本试剂盒靶向产碱普罗威登斯菌特异性保守基因，采用PCR扩增技术精准检测该致病菌核酸，可有效区分普罗威登斯菌属其他菌种及肠杆菌科其他致病菌。试剂盒抗样本干扰能力强，适配畜禽肠道样本、环境样本、病灶分泌物等，检测快速精准。适用于畜禽细菌性肠道感染、继发性感染疫病诊断、养殖环境致病菌污染检测及病原流行病学研究。
产品名称 | 产碱普罗威登斯菌PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P014644 |
英文名称 | Providencia alcalifaciensPCR | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
采集尿液、粪便等临床样本，裂解细菌提取基因组 DNA。
引物针对产碱普罗威登斯菌特异性基因设计，种特异性强。
荧光 PCR 扩增检测该致病菌核酸，用于尿路感染等病症病原排查。
操作步骤：
样本处理（样本处理区）
推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。
试剂配制（试剂准备区）
反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。
PCR扩增（核酸扩增区）
循环参数：
预变性：95℃ 2min（1循环）；
扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。
结果分析
阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；
阴性：无Ct值或曲线平直；
可疑：40<Ct≤45，需复测确认。
质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。
注意事项：
所有耗材必须无核酸酶，吸头一次性使用，禁止重复吸取；
阳性模板拷贝浓度高，开盖操作轻柔，避免气溶胶扩散造成全域污染；
试剂融化后冰上放置不超过 2 h，用完立即放回 - 20℃；
废弃 PCR 管、扩增产物、实验废液统一 121℃高压灭菌后丢弃；
试剂盒仅用于动植物、水产、微生物疫病科研检测，禁止人体临床检测；
移液器、操作台定期紫外消毒，长期污染需更换全新试剂盒全套试剂。
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