PerCP-Cy7标记的半胱天冬酶-3酶原抗体
原理特点
本抗体采用PerCP-Cy7串联荧光染料标记,染料发光强度高、荧光淬灭率低,与半胱天冬酶-3酶原特异性抗体偶联后,可精准识别细胞内未活化的Caspase-3前体蛋白。半胱天冬酶-3酶原是细胞凋亡通路的核心前体蛋白,是细胞凋亡启动的关键标志物,该抗体仅特异性结合未剪切的酶原形式,不识别活化亚型,特异性极强,远红外荧光波段可规避常规荧光干扰,适合多色流式细胞检测与细胞凋亡机制的定量分析,能够精准区分凋亡早期细胞与正常细胞。
英文名称:Caspase 3 precursor Rabbit pAb, PerCP-Cy7 conjugated
中文名称:PerCP-Cy7标记的半胱天冬酶-3酶原抗体
英文别名:Caspase 3 precursor; APOPAIN; CASP3; Caspase 3 apoptosis related cysteine protease; Caspase3; CPP32; CPP32B; Cysteine protease CPP32; Human cysteine protease CPP32 isoform alpha mRNA complete cds; PARP cleavage protease; SCA 1; SCA1; SREBP cleavage activity 1; Yama; CASP3_HUMAN; Caspase-3; CASP-3; Apopain; Protein Yama; SREBP cleavage activity 1; SCA-1.
标记物:PerCP-Cy7,远红荧光,多色流式常用串联染料
靶蛋白:Caspase-3 前体(35kDa),凋亡核心起始蛋白,剪切活化后为活化 Caspase-3
抗体类型:重组抗体 / 鼠源单克隆
种属反应:人、小鼠、大鼠
验证应用:流式细胞凋亡检测、免疫荧光、WB、IHC
蛋白功能:细胞凋亡执行关键分子,该抗体特异性识别未剪切酶原,区分凋亡起始与活化阶段
储存条件:2–8℃避光,严禁冻存
靶点背景
1. Pro-Caspase-3 是 Caspase-3 无活性前体,为细胞凋亡核心执行蛋白,静息细胞内以酶原形式胞质表达
2. 凋亡通路激活后被剪切活化形成活化型 Caspase-3,启动胞内底物切割、细胞形态凋亡改变
3. 该抗体可区分凋亡早期酶原未剪切状态,用于凋亡分期、药物诱导凋亡机制检测
抗体的鉴定
1)抗体的效价鉴定:鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2)抗体的特异性鉴定:抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
3)抗体的亲和力:是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。
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