FITC标记的刺激分子B7-1蛋白单克隆抗体
原理特点
该单克隆抗体经FITC绿色荧光标记,特异性识别抗原递呈细胞表面的B7-1共刺激分子,该分子是T细胞活化的第二信号关键配体,主导免疫激活、抗原递呈及免疫耐受调控。抗体特异性高、荧光均一性好,可精准标记树突状细胞、巨噬细胞、活化B细胞表面的B7-1蛋白,适合流式细胞术定量检测细胞免疫活化水平、免疫荧光定位分析,广泛应用于肿瘤免疫、移植免疫及炎症免疫机制研究。
英文名称:CD80 Mouse mAb, FITC conjugated
中文名称:FITC标记的刺激分子B7-1蛋白单克隆抗体
英文别名:Activation B7-1 antigen; B lymphocyte activation antigen B7; B7; B7-1; B7-1 antigen; BB1; CD28 antigen ligand 1; CD28LG; CD28LG1; CD80 antigen(CD28 antigen ligand 1, B7-1 antigen); CD80 antigen; CD80 molecule; CD80_HUMAN; Costimulatory factor CD80; costimulatory molecule variant IgV-CD80; CTLA-4 counter-receptor B7.1; LAB7; T-lymphocyte activation antigen CD80.
标记物:FITC 绿色荧光
靶蛋白:CD80/B7-1,共刺激分子
宿主:小鼠单克隆 IgG1 κ,克隆 2D10.4
种属:人
应用:流式细胞术(树突状细胞、活化 B 细胞分型)、免疫荧光
功能:抗原提呈细胞表面共刺激分子,结合 T 细胞 CD28 启动 T 细胞活化,免疫应答、自身免疫、肿瘤免疫检查点研究靶点
储存:2–8℃避光,勿冻存
靶点背景
1. B7-1(CD80)是抗原提呈细胞共刺激分子,表达于树突状细胞、巨噬细胞、活化 B 细胞
2. 结合 T 细胞 CD28 传递共刺激信号,是 T 细胞完全活化必需第二信号
3. 免疫应答、肿瘤免疫检查点、树突状细胞成熟度检测关键指标
实验优化与注意事项
抗体浓度优化
方阵滴定法:设置一抗浓度梯度(如1:200, 1:500, 1:1000)和二抗浓度梯度,选择信噪比最高的组合
预实验:首次使用建议进行浓度梯度预实验,确定最佳工作浓度
样本处理要点
细胞样本:贴壁细胞用细胞刮收集,悬浮细胞离心收集,尽量吸尽上清避免残留培养基
组织样本:新鲜组织建议液氮速冻后-80℃保存,避免反复冻融
磷酸化蛋白:全程冰上操作,加入磷酸酶抑制剂防止蛋白去磷酸化
结果判断与分析
WB:观察是否出现特异性条带,阴性对照应无条带或明显弱于阳性对照
IHC:阳性信号应定位于目标蛋白的正常亚细胞结构(如细胞核、细胞膜)
IF:观察荧光信号是否与目标蛋白亚细胞定位一致,DAPI染色定位细胞核
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