BF647标记的微管蛋白α/Tubulin α/α-tubulin单克隆抗体
原理特点
该单克隆抗体经BF647远红光标记，特异性识别α微管蛋白，α-tubulin是细胞骨架微管的核心组成亚基，参与细胞形态维持、细胞分裂、物质运输、细胞迁移等生命活动，是细胞实验中常用的内参蛋白。该抗体结合活性强、特异性极高，无其他骨架蛋白交叉反应，BF647荧光抗干扰能力强，可用于免疫荧光细胞骨架染色、蛋白表达内参校准、细胞形态与骨架重构机制研究。
英文名称:alpha Tubulin Mouse mAb, BF647 conjugated
中文名称:BF647标记的微管蛋白α/Tubulin α/α-tubulin单克隆抗体
英文别名：alpha tubulin 1; alpha-tubulin 1; Detyrosinated alpha Tubulin; FLJ30169; H2 alpha; TBA4A_HUMAN; Testis specific alpha tubulin; Testis-specific alpha-tubulin; TUBA 4A; TUBA1; Tuba4a; Tubulin alpha 1(testis specific); Tubulin alpha 1; Tubulin alpha 1 chain; Tubulin alpha 4a; Tubulin alpha 4A chain; Tubulin alpha-1 chain; Tubulin alpha-4A chain; Tubulin H2 alpha; Tubulin H2-alpha; TUBA4A; α-tubulin; α tubulin; Tubulin-alpha.
AF647荧光光谱
靶标：α-Tubulin α 微管蛋白，细胞骨架核心蛋白，通用内参蛋白
荧光标记：BF647（对标 AF647）；Ex=647 nm，Em=666 nm，近红外低背景
抗体类型：鼠 / 兔单克隆（经典克隆 TU-01、11H10）
种属反应：人、小鼠、大鼠、斑马鱼、果蝇、多种哺乳动物广谱反应
适用实验：免疫荧光骨架染色、流式、WB 内参、共聚焦多色共染
功能用途：细胞形态、有丝分裂、细胞骨架组装、药物骨架毒性研究
靶点背景
1. α- 微管蛋白是构成微管细胞骨架核心亚基，与 β-tubulin 组装微管结构
2. 维持细胞形态、纺锤体组装、胞内物质运输、细胞分裂进程调控
3. WB 内参蛋白、免疫荧光细胞骨架定位、细胞形态学对照常用指标
样本处理标准流程
1. 细胞样本制备
洗涤：用预冷PBS轻贴细胞表面洗涤2-3次，避免用力冲洗导致细胞脱落。
固定与通透：4℃预冷的4%多聚甲醛固定15-20分钟；如需检测胞内蛋白，用0.1-0.3% Triton X-100室温通透10-15分钟。
封闭：用5% BSA或10%胎牛血清室温封闭30-60分钟，减少非特异性结合。
2. 组织样本制备
石蜡切片：依次放入二甲苯（2次，每次10分钟）、梯度乙醇（100%→95%→80%→70%，各5分钟）脱蜡水化；柠檬酸缓冲液（pH6.0）热修复10-15分钟，自然冷却至室温。
新鲜组织：取材后立即用4%多聚甲醛固定24-48小时，或-80℃冷冻保存；冷冻切片厚度控制在5-10μm，贴片后自然干燥30分钟。
3. WB蛋白样本制备
用RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制剂）冰上裂解细胞30分钟，12000rpm离心15分钟取上清。
BCA法或Bradford法定量蛋白浓度，调整至上样量一致；加入5×SDS上样缓冲液，95℃加热5-10分钟变性，-20℃保存备用。
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