Cy5标记的Strep-Tag II(标签)单克隆抗体
原理特点
该单克隆抗体采用Cy5远红外荧光标记,精准靶向Strep-Tag II标签,该标签常用于重组蛋白的可溶性表达与亲和纯化。抗体仅特异性识别Strep-Tag II标签序列,无内源蛋白干扰,Cy5荧光波段远离细胞自发荧光区域,信噪比极高,可实现低丰度融合蛋白的原位检测与定位,适配免疫荧光成像、流式分析、蛋白表达定性定量检测,广泛应用于重组蛋白工程与蛋白互作研究。
英文名称:Strep-Tag II Mouse mAb, Cy5 conjugated
中文名称:Cy5标记的Strep-Tag II(标签)单克隆抗体
英文别名:Strep; Strep Tag II; Strep.Tag; Strep-Tag-II; Strep Tag-II; STREP II TAG.
靶标:Strep-Tag II(八肽标签 NWSHPQFEK,用于亲和纯化)
荧光标记:Cy5;Ex=647 nm,Em=665 nm
抗体类型:小鼠单克隆
种属反应:物种非依赖性,特异性识别 Strep-Tag II 融合蛋白
适用实验:WB、免疫荧光、流式、标签蛋白示踪
功能用途:Strep 系统纯化后蛋白检测、蛋白定位、双标多色实验
储存:-20℃避光,避免反复冻融
靶点背景
1. Strep-Tag II 为亲和纯化短肽标签,可特异性结合链霉亲和素
2. 温和洗脱条件即可纯化可溶性目的蛋白,蛋白活性保留度高
3. 蛋白亲和纯化、蛋白互作、外源表达蛋白特异性检测工具
实验优化与注意事项
抗体浓度优化
方阵滴定法:设置一抗浓度梯度(如1:200, 1:500, 1:1000)和二抗浓度梯度,选择信噪比最高的组合
预实验:首次使用建议进行浓度梯度预实验,确定最佳工作浓度
样本处理要点
细胞样本:贴壁细胞用细胞刮收集,悬浮细胞离心收集,尽量吸尽上清避免残留培养基
组织样本:新鲜组织建议液氮速冻后-80℃保存,避免反复冻融
磷酸化蛋白:全程冰上操作,加入磷酸酶抑制剂防止蛋白去磷酸化
结果判断与分析
WB:观察是否出现特异性条带,阴性对照应无条带或明显弱于阳性对照
IHC:阳性信号应定位于目标蛋白的正常亚细胞结构(如细胞核、细胞膜)
IF:观察荧光信号是否与目标蛋白亚细胞定位一致,DAPI染色定位细胞核
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