北京生夏蛋白技术有限公司/北京华利世
朱凯15810267201(手机微信)
产品说明:rTpypsin 3.0胰蛋⽩酶和rLys C蛋⽩酶是重组表达的⾦属蛋⽩酶。rTrypsin 3.0 蛋⽩酶超快速特异性裂解精氨酸(R)和赖氨酸(K)的C
端肽键;Lys C蛋⽩酶快速特异性裂解赖氨酸(K)的C端肽键。由于胰蛋⽩酶不能以相同的速率酶解精氨酸和赖氨酸,造成许多赖氨酸的漏切
同时有的赖氨酸有PTM修饰或C端紧邻强疏⽔性氨基酸(例如P),也会造成漏切问题。rTrypsin/rLys C复合蛋⽩酶适合处理难酶解消化的复杂蛋
⽩样品。⽤于蛋⽩表征单细胞组学和⼤队列蛋⽩组学研究。
物理形态:冻⼲粉含67ug海藻糖
分⼦量:rTrypsin 3.0: 23.7kDa;rLys C: 27kDa
溶解液:40ul 50mmol 醋酸溶解即浓度0.5ug/ul
储存条件:-20°C冰箱冷冻
保质期:-20°C 保质期24个月
pH 值范围:复合蛋⽩酶在pH7-9活性最佳
酶切⽅法:-适⽤酶切缓冲溶液:20mmol Tris,50mmoI ABC或HEPES 缓冲液;pH值在7-9范围内-变性蛋⽩样品:按照1:50蛋⽩酶和蛋⽩量使⽤,酶切反应蛋⽩浓度控制在0.5ug/u1,37℃⼲浴孵育30min
质量控制|Quality Control
纯度:液相⾊谱280nm检测检测杂质蛋⽩质峰强度,复合蛋⽩酶⾊谱峰强度⼤于99.0%
专⼀性:Secukinumab抗体蛋⽩样品,ESI-MS/MS质谱分析K和R端的专⼀性⼤于99.8%
活 性: rTrypsin 3.0: 15000u/mg; 单位定义:在 pH 7.8 和 25℃下,波长 253nm, 胰蛋白酶每分钟水解 1.0μmol BAEE 蛋白的量
rLys C: 25u/mg; 单位定义:pH7.8, 25℃条件下,波长 405nm, rLysC 每分钟水解 1.0μmol T-G-P-rLys Nitroanilid 的量
LC-MS/MS 质谱分析: Secukinumab 抗体蛋白使用 BT57 试剂 60℃变性还原烷基化,pH8.0, 45℃孵育 30min, 液质 QE HF 联用仪分析,重链覆盖率 55%(无漏切), 轻链覆盖率 69.8%(无漏切)。
关键字: 质谱级;复合酶;