北京生夏蛋白技术有限公司/北京华利世
朱凯15810267201(手机微信)
rAsp N 蛋白酶是重组表达的金属蛋白酶,来源于Pseudomonas fragi菌。特异性裂解天冬氨酸(D)和半胱氨酸(C)的N端肽键。如果
半胱氨酸还原或烷基化,仅-Asp-X 裂解。用于蛋白测序表征和蛋白组学研究。
物理形态: 含78.8ug Tris-HCl , 0.16mg海藻糖干粉
分子量: 22.4kDa
溶解: 20ul 超纯水溶解即浓度0.1ug/ul,避免反复冻溶
存储条件: –20 °C冰箱冷冻,有效期见产品标签
保质期:–20°C保质期12个月
pH值范围: rAsp N蛋白酶在pH7.5-8.5活性最佳
推荐SOP:
-适用酶切缓冲溶液:20mmol Tris,50mmolABC 或 HEPES 缓冲液; pH值在7-8范围内
-变性蛋白样品,按照1:10/50蛋白酶和蛋白量使用,酶切反应蛋白浓度控制在0.2-0.5ug/ul, 37°C干浴孵育2小时
质量控制 | Quality Control
纯度:液相色谱280nm检测检测杂质蛋白质峰强度,rAsp N蛋白酶色谱峰强度大于97.0%
专一性:胰高血糖素蛋白Glucagon经过rAsp N 37°C酶切 2小时,ESI-MS/MS质谱分析特异性肽段专一性100%
活性: 1800u/mg;单位定义: 1ug rAsp N蛋白酶稀释50倍与0.072umol抗菌肽A蛋白反应的量,反应条件:50ul 20mmol Tris, pH=8.0, 37°C干
浴孵育1小时,HPLC色谱分析
LC-MS/MS 质谱分析: 50ug 胰高血糖素蛋白Glucagon加50ul 50mmolTris,1ug rAsp N 3 7°C孵育2小时,通过ESI QE HF液质分析特异性
(包括错切和漏切)
非特异性:蜂毒肽和Fequesetide经过rAsp N 37°C酶切 1小时,ESI-MS/MS质谱分析未检出非特异性肽段。
关键字: rAsp-N 蛋白酶 质谱级;天冬氨酸内切蛋白酶;重组天冬氨酸蛋白酶 N;重组 Asp-N 蛋白酶;ASPN蛋白酶;