北京生夏蛋白技术有限公司/北京华利世
朱凯15810267201(手机微信)
质谱级PNGase F 糖苷酶特异性水解复杂的糖蛋白的寡糖和高甘露糖链接的天冬酰胺,酶切掉天冬氨酸脱氨基的天冬酰胺,保留低聚糖蛋白
完好无损。但是不会去除低聚糖含有α(1→3)核心岩藻糖。
物理形态: 20mM Tris-HCl(pH 7.5 at 25°C), 50mM NaCl and 5mM EDTA溶液
分子量: 35kDa.
浓度:10000 U/ml (1U=65 NEB units)
储存条件:存储在4-10℃冰箱,禁止-20℃以下低温冷冻
保质期:4℃保质期24个月
pH 范围: PH6.0–10.0 有活性, PH=8.6具有最佳活性
适用范围:特异性酶切糖蛋白的 N端寡糖
溶液内酶解SOP:
变性酶切:
1.在 50mM 碳酸氢铵 (pH 7.8)溶液中加入20ug变性的糖蛋白,调整体积至 18µl.
2.加 2µl rPNGase F溶液
3. 37°C条件下, 保温 1–2 小时酶切糖蛋白样品
Native酶切:
1. 在 50mM 碳酸氢铵 (pH 7.8)溶液中加入50ug糖蛋白,调整体积至 50ul.
2.加 1ul rPNGase F溶液
3. 37°C条件下, 保温 1–2 小时酶切糖蛋白样品
质量控制|Quality Control
纯度: HPLC检测分析杂质蛋白峰强度,rPNGase F峰峰高比大于99.5%
活性:40000unit/min/mg;单位定义:rPNGase F蛋苷酶每分钟酶切1.0 umole 变性的Ribonuclease B的量,反应条件:37℃,PH7.5,LC-MS分析
特异性质谱分析:变性的RNase B 使用rPNGase F糖苷酶在37℃酶切60min后,试用LC-MS分析,RNase B去除N-聚糖>98%
关键字: rPNGase F 糖苷酶 质谱级;肽N-糖苷酶F;PNGase F糖苷内切酶;糖苷酶;