大鼠半乳糖-1-磷酸尿苷酰转移酶(GALT)重组蛋白 新品

大鼠半乳糖-1-磷酸尿苷酰转移酶(GALT)重组蛋白用于半乳糖代谢酶活测定、半乳糖血症病理机制、糖类代谢紊乱功能验证实验。

型号：YS-DB939

产品名称：大鼠半乳糖-1-磷酸尿苷酰转移酶(GALT)重组蛋白

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名称：Recombinant Galactose-1-Phosphate Uridylyltransferase (GALT)

UDP-glucose--hexose-1-phosphate uridylyltransferase

酶与激酶

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：高尔基体

预测分子量：47.0kDa

实际分子量：47kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Met1~Ala379 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：6.1

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

纯度检测（SDS-PAGE）：电泳染色评估蛋白纯度，检测降解片段；

分子量验证：电泳条带比对 Marker，确认 GALT 分子量符合理论预期；

浓度定量（BCA 法）：肽键还原 Cu²⁺显色，标准曲线定量蛋白浓度；

酶活检测：催化半乳糖 - 1 - 磷酸与 UDP 葡萄糖基团交换，产物高效液相色谱定量测定转移酶活性。
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常见实验场景操作指南：

细胞培养实验

浓度优化：先设置预实验梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况，确定最优工作浓度。

添加时机：细胞接种后24-48小时，待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。

更换培养基：若蛋白半衰期较短，需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。

免疫检测实验

阳性对照设置：在ELISA或WB实验中，用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线，确保定量准确性。

封闭处理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭，降低非特异性结合。

抗体配对：选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体，避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。

蛋白相互作用实验

标签选择：若使用Pull-down实验，优先选择GST或His标签的重组蛋白，便于亲和层析分离。

反应条件：在生理缓冲液（如PBS）中进行，温度控制在4℃，避免蛋白变性。

阴性对照：设置不含目标蛋白的对照组，排除标签非特异性结合的干扰。