本试剂盒采用间接ELISA检测原理,将纯化的卵清蛋白(OVA)抗原包被于酶标板微孔,加入待测大鼠血清样本,样本中的OVA特异性IgE抗体可与固相OVA抗原特异性结合,洗涤后加入酶标记抗大鼠IgE抗体,催化底物显色,终止反应后检测吸光度,结合标准曲线定量检测大鼠样本中OVA sIgE的含量。
基本参数:

产品名称:大鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒
英文名称:OVA sIgE ELISA Kit
货号:Y-E1176
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤0.05IU/mL
检测范围:0.1IU/mL - 10IU/mL
反应时间:总反应时长160min
保存条件:2-8℃避光密封保存,抗体结合物单独避光存放
有效期:未开封有效期6个月
显色系统:特异性免疫TMB显色体系
检测波长:450nm单波长检测
标准曲线绘制:OVA sIgE标准品梯度稀释,拟合标准曲线,定量检测特异性抗体含量
特异性:仅识别大鼠OVA特异性IgE,与普通IgE、其他过敏原抗体无交叉反应
重复性:板内CV<9%,板间CV<11%
注意事项:血清样本新鲜制备,避免抗体失活;全程避光反应,防止显色底物降解;严格控制温育时间,保证结合特异性
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

微孔板每孔加入标准品梯度液 55μL,OVA 致敏大鼠血清样本 55μL,设置阴性对照孔。
全孔加入特异性酶标记抗体 96μL,封板避光,37℃孵育 72min。
弃净废液,洗涤液浸泡每孔 31s,拍干水分,洗板 5 次。
避光加入显色 A、B 液各 50μL,混匀后暗处显色 17min。
加入终止液 50μL 终止显色反应,摇晃微孔板混匀。
酶标仪 450nm 测定 OD 值,存储原始读数。
曲线换算 OVA 特异性 IgE 浓度,判定致敏抗体表达水平。
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关键字: 大鼠卵清蛋白特异性IgE;OVA sIgE;ELISA试剂盒;
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