大鼠脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔包被大鼠BNP特异性单克隆抗体，样本与标准品中的BNP抗原与固相抗体特异性免疫结合，洗板后加入酶标记二抗形成稳定复合物，催化底物显色，通过检测吸光度数值，结合标准曲线定量检测大鼠样本中BNP的浓度。
基本参数‌：

产品名称：大鼠脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒

英文名称：BNP ELISA Kit
货号：Y-E1449

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤0.1pg/mL

检测范围：0.5pg/mL - 200pg/mL

反应时间：总反应时长140min

保存条件：2-8℃避光保存，多肽激素试剂现配现用，避免失效

有效期：未开封有效期6个月

显色系统：超高灵敏度TMB显色体系，适配微量多肽检测

检测波长：450nm、630nm双波长检测

标准曲线绘制：宽范围梯度标准品拟合曲线，精准检测微量BNP含量

特异性：特异性结合大鼠BNP，与ANP、CNP等钠尿肽无交叉反应

重复性：板内CV＜7%，板间CV＜9%

注意事项：血浆样本抗凝处理，避免肽类降解；全程低温避光操作；微量检测严格避免污染、误差
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

预包被板每孔加入标准品稀释液 49μL，大鼠心肌组织上清样本 49μL，设置空白对照孔。

每孔加入 HRP 标记抗体液 103μL，覆膜密封，37℃孵育 65min。

废液倾倒干净，洗涤液浸泡 26s，拍干，洗板 4 次。

避光滴加显色 A、B 液各 50μL，轻微震动板体，显色 19min。

加入终止液 50μL 终止显色，充分混匀微孔板体系。

酶标仪 450nm 检测 OD 值，存储全部检测结果。

标准曲线换算 BNP 浓度，评价心功能相关指标水平。
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