人Dickkopf 1(DKK1)ELISA试剂盒

本试剂盒采用经典双抗体夹心ELISA原理，酶标板预先包被纯化的人DKK1特异性抗体，加入标准品、血清、细胞上清等待测样本，样本中的DKK1抗原与固相抗体特异性结合，洗涤后加入HRP标记的DKK1抗体，形成固相抗体-抗原-酶标抗体免疫复合物，经底物显色、终止反应后，测定各孔OD值，通过标准曲线拟合计算，精准检测样本中人DKK1的浓度。
基本参数‌：

产品名称：人Dickkopf 1(DKK1)ELISA试剂盒

英文名称：DKK1   Elisa Kit
货号：Y-E231

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测值0.08ng/mL，适配肿瘤、发育相关微量DKK1蛋白检测

检测范围：0.16ng/mL - 15ng/mL，覆盖人体正常及肿瘤病变样本表达范围

反应时间：全流程实验时长95分钟，反应体系稳定，显色均匀快速

保存条件：2-8℃避光保存，终止液、显色液分开存放，避免混色污染

有效期：未开封有效期12个月，试剂开封后密封保存可使用30天

特异性：特异性识别人类DKK1蛋白，与DKK2、DKK3、DKK4同源蛋白无交叉反应

重复性：板内变异＜7%，板间变异＜8%，实验重复性优异

注意事项：标准品需精准稀释，现配现用；温育温度严格控制在37℃，温差过大会导致结果偏差
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：

试剂室温平衡 30min，配制洗涤工作液；DKK1 标准品复溶后梯度稀释，待测样本离心分离上清备用。

预包被板设置空白、标准、待测孔，每孔加样 100μL，空白孔加入空白稀释液。

全部孔中直接加入酶偶联 DKK1 检测抗体 100μL，混匀后封板膜封严微孔板。

37℃避光孵育 55min，不可中途掀开封板。

倾倒孔内液体，加满洗涤液浸泡 35s 后拍干，重复洗板 5 轮，去除非特异性结合物质。

每孔加入 TMB 显色底物 100μL，避光室温显色 16min。

加入终止液终止显色，酶标仪 450nm 读数，依据标准曲线计算样本 DKK1 浓度。
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