猴B病毒(BV)ELISA试剂盒

本试剂盒采用间接ELISA检测原理，酶标板固相包被猴B病毒（BV）特异性抗原，待测样本中的猴B病毒抗体可与固相抗原特异性结合，洗涤去除未结合杂质后，加入酶标记抗物种二抗进行结合反应，经底物显色产生特异性显色信号，显色强度与样本中BV抗体含量呈正相关，通过吸光度检测及标准曲线比对，可定量检测样本中猴B病毒抗体水平。
产品参数：

‌灵敏度：最低病毒抗体检出阈值1:100，可早期精准检测猴B病毒隐性感染样本。

检测范围：适配猴血清样本B病毒抗原、抗体定性定量检测，覆盖感染初期、高峰期浓度梯度。

反应时间：总实验时长110分钟，病毒样本孵育50分钟，显色稳定20分钟。

保存条件：2-8℃密封避光保存，病毒检测试剂严禁室温久置。

有效期：原装未开封有效期12个月。

特异性：特异性识别猴B病毒，与猴疱疹病毒、其他人畜共患病毒无交叉反应。

重复性：板内CV≤6%，板间CV≤8%，动物检疫检测数据稳定。

注意事项：实验需在生物安全二级实验室操作，样本严格灭活处理；避免气溶胶污染。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 31min，稀释洗涤液，取出包被微孔板，编排样本加样顺序。

设置阴阳性对照、梯度标准品，猴待测样本上清稀释，每孔加 50μL 对应液体。

所有孔直接加入酶标记抗原工作液 100μL，封板密封防止挥发。

37℃避光孵育 62min，竞争结合固相抗体位点。

洗板 6 次，每孔加满洗涤液静置 29s，拍干微孔去除未结合试剂。

避光加入显色 AB 液各 50μL，摇匀后 37℃显色 14min。

终止液终止显色，酶标仪 450nm 读数，结合对照判定猴 B 病毒感染情况并定量。