人α烯醇化酶(αENOL)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附技术检测样本中人α烯醇化酶水平，包被于酶标板的特异性抗αENOL抗体可特异性捕获样本中的αENOL抗原，未结合的非目标物质经洗涤去除，随后加入酶标记特异性抗体与结合的抗原结合，构建稳定的免疫复合物，底物在酶的催化下产生有色产物，终止反应后检测吸光度，根据标准品浓度与吸光度的对应关系，精准计算待测样本中αENOL的含量。
产品参数：

‌1.灵敏度：检出下限 0.05U/L

2.检测范围：0.156~10U/L

3.反应时间：室温封闭 30min，样本温育 75min，酶标二抗 50min，显色 12min

4.显色系统：HRP 催化 TMB 显色

5.检测波长：主波长 450nm，校正波长 570nm

6.特异性：针对 α 亚型烯醇化酶，与 γ 神经元烯醇化酶交叉反应＜5%

7.重复性：批内 CV＜7%，批间 CV＜9%

8.注意事项：血清样本需无溶血；试剂盒所有组分使用前平衡至室温
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。

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实验操作流程：

取出试剂盒全部试剂置于室温放置 35min，溶解标准品并做 6 个浓度梯度稀释，规划酶标板排布，区分标准孔、样品孔、零值空白孔。

使用微量移液器向各微孔定量加样，标准孔加梯度标准液，样本孔加预处理后待测样本，空白孔添加等量样本稀释液，加样过程杜绝串孔。

每孔直接加入酶标记检测抗体工作液，封板密封后置于 37℃孵箱避光孵育 70min，一次性完成夹心免疫结合。

弃除板内液体，每孔加满洗涤缓冲液，浸泡 35s 后甩干，循环洗板 6 次，最后在吸水纸上用力拍干微孔残余洗液。

每孔加入等体积显色底物 A、B 混合液，避光静置显色 18min，期间避免强光直射酶标板。

逐孔添加终止反应液，终止底物显色，轻微振荡酶标板 30s 确保每孔液体混匀。

酶标仪调至 450nm 检测波长读取 OD 值，根据标准曲线计算待测样本中 αENOL 具体浓度数值。