本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板预先包被人蛋白S特异性捕获抗体，待测样本中的人蛋白S抗原可与固相抗体特异性结合，孵育结束后洗涤除去游离杂质，加入酶标记的人蛋白S检测抗体，形成固相抗体-人蛋白S抗原-酶标抗体的免疫夹心结构，再次洗涤后加入底物液显色，酶催化底物生成有色产物，吸光度值随样本中人蛋白S浓度升高而增大，依托标准曲线可精准定量检测目标物质含量。
基本参数：
产品名称：人蛋白S(Protein S)ELISA试剂盒
英文名称：Protein S ELISA Kit
货号：Y-E2623
规格：48T/96T
灵敏度：≤0.18μg/mL
检测范围：0.39μg/mL - 25μg/mL
反应时间：总时长 120min（包被结合 65min，二抗 35min，避光显色 20min）
显色系统：可溶性 TMB 显色底物
检测波长：450nm
特异性：可检测游离蛋白 S，不结合 C4bBP 结合型复合物
重复性：板内 CV＜6.2%，板间 CV＜7.8%
注意事项：样本采集后 2h 内分离血浆，室温放置不得超过 4h
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒室温平衡 28min，配制工作洗涤液，梯度稀释蛋白 S 标准品，酶标板做好孔位标记，区分三类反应孔。
标准孔加梯度标品，样本孔加入离心预处理待测样本，空白孔加稀释缓冲液，所有孔加入一步法酶结合液，密封封板。
37℃避光孵育 55min，完成夹心免疫一步法结合过程。
弃液洗板，每孔注满洗涤液浸泡 30s，甩干拍净，重复洗板 5 次。
加入显色底物混合液，低速震荡酶标板，37℃避光显色 18min。
加入终止液终止显色，混匀板面反应体系。
450nm 波长酶标仪读数，绘制标准曲线，计算样本蛋白 S 浓度数值。
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