人吡哆醛/吡哆醇维生素B6激酶(PDXK)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附技术检测样本中人吡哆醛/吡哆醇维生素B6激酶(PDXK)含量。试剂盒酶标板预固定PDXK特异性捕获抗体，孵育后样本中的PDXK抗原与固相抗体特异性结合，经洗涤去除游离杂质，加入生物素化检测抗体与酶标亲和素形成夹心免疫复合物，底物显色后终止反应，吸光度数值与样本中PDXK蛋白浓度呈正相关，通过标准曲线拟合即可实现样本中目标激酶的定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：最低检出 0.07U/L

检测范围：0.14U/L～8.9U/L

反应时间：抗原孵育 55min，二抗孵育 38min，显色 22min

显色系统：双液型 TMB 显色试剂

检测波长：450nm

特异性：抗人 PDXK 单克隆抗体，同家族激酶无交叉结合

重复性：板内 CV≤6.8%，板间 CV≤9.8%

注意事项：试剂盒所有组分避免反复冻融，洗涤步骤每孔浸泡不少于 30s
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

板孔内同时添加梯度标准品、待测上清样本、酶标记二抗，密封酶标板，37℃孵育 60min，洗板 5 次。

洗涤工作液浸泡微孔 30s 后弃去废液，连续洗板后倒扣拍干。

每孔添加显色液 A、B 混合液，避光室温反应 16min。

滴加终止液停止显色反应，轻晃酶标板混匀。

酶标仪 450nm 读取各孔吸光度并记录。

依据标准品浓度与 OD 值绘制标准拟合曲线。

代入样本吸光值计算 PDXK 含量，整理实验原始数据出具结果。