本试剂盒依托双抗体夹心ELISA检测技术,微孔板包被人巨噬细胞炎性蛋白1α特异性捕获抗体,待测样本中的MIP-1α抗原可与固相抗体特异性结合;孵育洗涤去除杂质后,加入辣根过氧化物酶标记的对应检测抗体,形成完整的免疫夹心复合物;通过酶促显色反应产生有色产物,吸光度值与样本中MIP-1α含量正相关,结合标准曲线可定量测定样本中该炎性蛋白的浓度。
基本参数:

产品名称:人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒
英文名称:MIP-1α Elisa Kit
货号:Y-E128
规格:48T/96T
灵敏度:检出限 0.4pg/mL
检测范围:0.8~51.2pg/mL
反应时间:温育 102min,酶标记物 60min,避光显色 20min
保存条件:2~8℃密封储存,标准品溶解后建议分装冻存
显色系统:HRP 催化 TMB 显色,酸性终止液终止
检测波长:450nm,630nm 扣除孔底背景
标准曲线绘制:四参数 Logistic 回归绘制标准曲线,软件自动计算样本细胞因子浓度
注意事项:炎症样本避免反复冻融;每块板必须配套标准曲线;洗板次数不少于 6 次
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂常温回温 26min,拆分酶标板,排布标准孔、样品孔、空白孔,每孔加入待测稀释液 100μL,空白孔补稀释液。
直接添加酶标记抗体工作液 60μL,震荡混匀覆膜密封。
37℃避光孵育 57min,避免强光接触底物。
开封弃净废液,洗涤液加满每孔静置 35s 后拍干,循环洗板 4 次。
加入显色 A、B 液各 50μL,暗处 37℃显色 12min。
滴入终止液 50μL 混匀终止反应。
450nm 检测吸光度,对照标准曲线计算 MIP-1α 含量。
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关键字: 人巨噬细胞炎性蛋白1α;MIP-1α/CCL3;ELISA试剂盒;
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