人钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附法，酶标板固相包被人钙粘蛋白相关神经受体1特异性抗体，样本及标准品中的CNR-1抗原可与捕获抗体特异性结合，再加入酶标记检测抗体构建夹心免疫复合物，经洗涤去除未结合杂质后启动显色反应，显色强度与样本中CNR-1浓度正相关，通过酶标仪检测与标准曲线计算，可精准定量该受体的含量。
产品参数：

‌灵敏度：检出限 0.9ng/mL

检测范围：3ng/mL～96ng/mL

反应时间：样本孵育 80min，二抗 60min，显色 20min

显色系统：A+B 混合显色底物

检测波长：450nm

特异性：仅结合 CNR-1 胞外抗原区，同家族其他神经受体无交叉反应

重复性：板内 CV≤9%，板间 CV≤11.2%

注意事项：脑组织匀浆样本需离心去除细胞碎片；显色全程严格避光
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂室温平衡 31min，梯度稀释标准品，酶标板设定空白、标品、样本孔，每孔上样 50μL，空白孔无添加。

所有孔位加入一步法酶反应工作液 100μL，封板密封，轻拍板体混匀反应液。

37℃避光孵育 70min，单层放置酶标板孵育。

弃去孔内液体，洗涤液注满微孔静置 33s 弃液，洗板 5 次，充分拍干微孔残留洗液。

每孔加入显色混合底物液 100μL，37℃避光显色 15min。

加入终止液 50μL 终止酶促显色，摇匀酶标板。

450nm 波长检测吸光值，对照标准曲线计算 CNR-1 表达量。