本试剂盒采用间接酶联免疫吸附试验原理，酶标板固相包被纯化的BP180抗原，待测样本中的抗BP180抗体与微孔内固相抗原特异性结合，洗涤去除未结合组分后，加入辣根过氧化物酶标记的抗人抗体，与样本特异性抗体结合，孵育后加入显色底物发生显色反应，终止反应后测定吸光度，通过标准曲线换算得到样本中抗BP180抗体的含量。
基本参数：
产品名称：人抗BP180抗体(BP180-Ab)ELISA试剂盒
英文名称：BP180-Ab Elisa Kit
货号：Y-E457
规格：48T/96T
灵敏度：0.1IU/mL
检测范围：0.2–20IU/mL
反应时间：室温孵育 90min，洗板后二抗 60min，避光显色 14min，终止读数
保存条件：2～8℃，底物液严禁光照，不可冻存
显色系统：单组分稳定型 TMB 显色液
检测波长：450nm，参比 630nm
标准曲线绘制：6 点标准品，四参数拟合曲线计算抗体 IU 浓度
注意事项：皮肌炎、其他自身免疫病血清易出现交叉反应，需结合临床；洗板液注满孔底，浸泡 30s 再拍干
关键注意事项：
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）
避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果
显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：
样本处理规范
血清样本采集后室温凝固离心取上清，4℃短期保存≤24h，长期 - 20℃分装保存，检测前室温融化混匀。
试剂稀释平衡
所有试剂室温平衡 26min，25 倍浓缩洗涤液用蒸馏水稀释为使用液，现配现用。
标准品加孔稀释
BP180 抗体标准品复溶后梯度稀释，依次添加 50μL 至标准品系列孔，设置阴阳对照孔。
样本与标记物共孵育
待测样本每孔 50μL，加入 HRP 标记 BP180 抗原溶液 50μL，封板膜密封，37℃孵育 50min。
洗板去除未结合组分
倾倒废液，加满洗涤液浸泡 35s，倒扣拍干，重复洗板 6 次，杜绝孔间污染。
避光显色反应
每孔添加显色液 A、B 混合液 100μL，遮光 37℃反应 17min，不得随意延长时间。
终止定量检测
终止液终止显色，450nm 波长测 OD 值，根据标准曲线换算样本抗 BP180 抗体浓度。
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