本试剂盒采用间接ELISA检测原理,将纯化的人α干扰素抗原包被于酶标板固相微孔,加入待测样本后,样本中的抗α干扰素抗体与固相抗原特异性结合,洗板去除未结合物质,加入酶标记抗人免疫球蛋白二抗与之结合,经底物催化显色、终止反应后,检测吸光度数值,通过标准曲线换算样本中抗α干扰素抗体的浓度。
基本参数:

产品名称:人抗α干扰素抗体(IFNα-Ab)ELISA试剂盒
英文名称:IFNα-Ab Elisa Kit
货号:Y-E475
规格:48T/96T
灵敏度:0.07ng/mL
检测范围:0.14–7ng/mL
反应时间:样本孵育 60min,二抗 40min,显色 12min,总 112min
保存条件:2~8℃冷藏,冻干标准品复溶后 - 20℃分装冻存
显色系统:稳定型单组分 TMB 显色液
检测波长:450/620nm
标准曲线绘制:Logistic 四参数拟合标准曲线,直接读取样本抗体浓度
注意事项:使用干扰素治疗患者样本适合检测;避免试剂结冰失效
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

样本离心处理
血清样本 3000r/min 离心 15min,吸取上层血清,溶血样本直接舍弃不予检测。
试剂室温平衡稀释
整套试剂室温静置 29min,浓缩洗涤液用去离子水稀释配比,搅拌均匀。
标准品系列加样
IFNα 抗体标准品复溶倍比稀释 6 个梯度,每孔加入 50μL 对应浓度标准品。
一步法共孵育
待测样本 50μL,加入酶标记 α 干扰素抗原液 50μL,封板 37℃孵育 55min。
微孔洗涤步骤
弃净孔内液体,洗涤液浸泡 35s 拍干,循环洗板 5 次,杜绝交叉污染。
避光底物显色
每孔加入显色液 A、B 混合液 100μL,遮光 37℃显色 14min。
终止检测计算
终止液终止反应,450nm 读取吸光值,依据标准曲线定量抗体水平。
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