人干扰素调节因子(IRF)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附技术，酶标板包被抗人干扰素调节因子特异性抗体，样本中的IRF抗原可与固相抗体特异性结合，叠加酶标记二抗形成稳定夹心复合物，洗涤去除未结合物质后催化底物显色，显色强度随IRF浓度升高而增强，依托标准曲线可完成样本中IRF的定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：最低可测 2.1ng/L

检测范围：7ng/L～224ng/L

反应时间：37℃结合 60min，二抗 50min，显色 17min

显色系统：双组份 TMB 显色体系

检测波长：450nm+630nm

特异性：特异性结合 IRF 家族保守 DNA 结合区，无其他转录因子交叉反应

重复性：批内 CV＜7.7%，批间 CV＜9.9%

注意事项：核蛋白样本避免核酸污染；洗板每孔洗涤液加注量不少于 300μL
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

整套试剂盒室温放置 30min，梯度稀释标准品，微孔板编号分组，每孔上样 50μL，空白孔不加任何液体。

全部孔位加入一步法酶标记抗体液 100μL，封板密封，上下轻拍酶标板混匀。

37℃恒温避光孵育 62min，酶标板单层平放孵育。

倾倒孔内废液，洗板液浸泡微孔 35s，洗板 5 次，倒扣板条拍干余液。

依次添加显色 A 液、B 液各 50μL，37℃避光显色 17min。

逐孔加注终止液 50μL 混匀终止酶促反应。

15min 内 450nm 读板，标准曲线法定量干扰素调节因子浓度。