本试剂盒运用双抗体夹心ELISA技术检测样本中人高速泳动蛋白17的含量。提前将HMG-17特异性单克隆捕获抗体包被于96孔固相微孔板,加入待测样本后,样本中的HMG-17蛋白与固相抗体特异性结合,洗除未结合杂质后,加入对应的酶标记检测抗体,形成特异性免疫夹心复合物,经洗涤去除游离反应物,加入显色底物发生酶促显色反应,显色强度与样本中HMG-17蛋白浓度呈正相关,通过检测吸光度并对照标准曲线,可精准定量目标蛋白含量。
产品参数:
产品名称 | 人高速泳动蛋白17(HMG-17)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E3524 |
英文名称 | HMG-17 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:检出下限 0.08ng/mL
检测范围:0.25~16ng/mL
反应时间:包被板结合样本 70min,酶标二抗 45min,显色 18min
显色系统:可溶性 TMB 显色液,终止液为 1mol/L 硫酸
检测波长:450nm
特异性:专一识别人 HMG-17,与 HMG-1、HMG-2 无交叉识别
重复性:批内 CV≤6.2%,批间 CV≤8.3%
注意事项:样本需添加蛋白酶抑制剂,防止蛋白降解;未用完板条密封冷藏
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
试剂盒全部组分室温平衡 32min,稀释配制 HMG-17 梯度标准品,排布标准孔、待测孔、空白孔。
各孔加入 50μL 标准品或经稀释处理后的细胞上清待测样本,空白孔补加样本稀释液。
直接添加酶偶联抗 HMG-17 抗体 100μL,封板膜封板,37℃恒温孵育 70min 完成一步夹心结合。
洗板操作 5 次,每次注入洗涤液浸泡 40s,倒扣板条于吸水纸上拍干废液。
每孔加入 TMB 显色工作液 100μL,室温避光显色 20min。
加入终止液 50μL 终止显色反应,水平晃动微孔板混匀体系。
酶标仪 450nm 测 OD 值,绘制标准曲线,计算样本中 HMG-17 蛋白表达量。
关键字: 人高速泳动蛋白17;HMG-17;ELISA试剂盒;
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