本试剂盒采用间接ELISA检测原理，将纯化的PM-Scl/PM-1抗原包被于酶标板微孔，封闭非特异性位点后加入待测样本，样本中的抗多发性肌炎硬皮病抗体与固相抗原特异性结合，洗板除去未结合杂质，加入酶标记抗人二抗孵育结合，经显色、终止反应后测定吸光度，结合标准曲线精准定量该抗体的样本浓度。
基本参数：
产品名称：人抗多发性肌炎硬皮病抗体(PM-Scl/PM-1)ELISA试剂盒
英文名称：PM-Scl/PM-1 Elisa Kit
货号：Y-E449
规格：48T/96T
灵敏度：0.18RU/mL
检测范围：0.35–27RU/mL
反应时间：样本孵育 95min，二抗 60min，显色 19min，总 174min
保存条件：试剂盒 2～8℃密封防潮，板条剩余部分放回铝箔袋冷藏
显色系统：HRP-TMB 显色体系
检测波长：450nm
标准曲线绘制：六点校准品四参数拟合标准曲线定量
注意事项：肌炎合并硬皮病重叠综合征检出率最高；环境温度需控制在 20–25℃
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
样本离心提纯
血清样本 10000r/min 离心 9min 去除杂质沉淀，澄清上清用于后续检测。
试剂回温稀释
所有试剂室温放置 34min，稀释浓缩洗涤液配制成 1× 工作洗涤液。
标准品梯度加样
PM-Scl 抗体标准品复溶倍比稀释 7 梯度，每标准孔加 50μL 标准品溶液，空白孔仅加缓冲液。
抗原抗体一步孵育
待测样本 50μL，加入生物素标记 PM-Scl 抗原 50μL，密封酶标板，37℃孵育 72min。
多次洗板操作
弃净液体，洗涤液浸泡 30s 拍干，重复洗板 5 次，吸水纸压干微孔水分。
亲和素显色反应
加入 HRP 标记亲和素孵育 30min，洗板后添加 TMB 显色液避光显色 16min。
终止定量读数
终止液终止反应，450nm 测定 OD 值，绘制标准曲线计算抗体含量。
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