本试剂盒采用经典间接ELISA技术原理,将纯化的人肝特异性脂蛋白抗原固定于酶标板固相表面,加入待测临床样本后,样本内的抗肝特异性脂蛋白抗体与固相抗原发生特异性免疫结合;经充分洗涤去除游离杂质后,加入酶标记二抗与样本抗体结合,孵育后洗涤去除未结合酶标试剂,加入底物液触发显色反应,吸光度数值随样本中LSP抗体含量升高而增大,依据标准曲线可精准定量样本中目标抗体含量。
基本参数:

产品名称:人抗肝特异性脂蛋白抗体(LSP)ELISA试剂盒
英文名称:LSP Elisa Kit
货号:Y-E461
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出 0.9AU/mL
检测范围:1AU/mL~16AU/mL
反应时间:温育 1h;二抗结合 35min;底物显色 10min
保存条件:2~8℃避光保存,板条独立分装密封防吸潮
显色系统:单液型 TMB 显色液
检测波长:450nm
标准曲线绘制:标准品倍比稀释,线性方程拟合,扣除空白 OD 后计算样本浓度
注意事项:黄疸、重度溶血样本不建议检测;试剂开盖后尽快使用,防止效价下降
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

样本稀释:血清样本按 1:90 比例用配套稀释液稀释,涡旋震荡混匀,室温静置 7min,溶血样本舍弃不用。
酶标板加样:取出包被板条,标记孔位,空白孔仅加稀释液,其余孔分别加入对照液与稀释待测样本各 100μL。
一步加入酶标二抗:所有孔直接加入酶标记羊抗人 IgG 抗体工作液 100μL,封板膜封口,手动轻摇板面 20s。
恒温孵育:37℃避光孵育 50min,不可中途开盖,避免温度波动影响结合效率。
洗板流程:弃液,每孔加满洗涤液浸泡 35s,倒扣在吸水纸上拍干,循环洗板 5 次。
显色反应:每孔加入显色液 AB 混合液 100μL,避光 37℃显色 14min。
终止检测:加终止液 50μL 终止,混匀后立即在 450nm 波长下测 OD 值,计算抗体相对含量。
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