本试剂盒依托间接ELISA检测原理,微孔板固相包被纯化的人杀菌通透性增高蛋白(BPI)抗原,待测样本中的抗BPI抗体可与固相BPI抗原特异性结合,孵育反应后洗去未结合的杂蛋白与游离物质;加入辣根过氧化物酶标记的抗人二抗,与结合的BPI-Ab抗体特异性结合,形成免疫复合物;经洗板纯化后加入底物显色,显色深浅与样本中BPI-Ab含量正相关,终止显色后检测吸光度,对照标准曲线可定量检测目标抗体水平。
基本参数:

产品名称:人抗杀菌通透性增高蛋白抗体(BPI-Ab)ELISA试剂盒
英文名称:BPI-Ab Elisa Kit
货号:Y-E519
规格:48T/96T
灵敏度:0.22RU/mL
检测范围:0.44RU/mL - 14.08RU/mL
反应时间:样本孵育 68min,酶结合物 36min,显色 13min
保存条件:试剂盒 2~8℃,浓缩试剂稀释后不可长期储存
显色系统:单组份 TMB 显色液
检测波长:450/620nm 双波长读数
标准曲线绘制:8 点标准品构建标准曲线,空白孔用于基线校正
注意事项:脓毒血症、炎症性肠病样本易干扰检测结果,采血尽量在抗感染治疗前完成
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒所有试剂室温平衡 23min,取出酶标板条固定于板架,分类标记各实验组孔位。
待测样本按比例稀释后每孔加样 100μL,阴性对照、阳性对照直接加对应试剂 100μL,空白孔空置。
直接向全部非空白孔加入酶二抗工作液 100μL,封板膜密封,轻震酶标板混匀 30s。
37℃水浴孵育 42min,水浴温度严格控制 37℃无偏差。
去除封板膜,弃去孔内液体,洗涤液加满浸泡 24s 甩干,洗板 5 次,最后吸干微孔水分。
单孔加入显色底物 A、B 液各 50μL,避光混匀,37℃避光显色 19min。
加入终止液 50μL 终止显色,混匀后 450nm 检测 OD 值,绘制标准曲线得出样本抗体检测结果。
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