人假定蛋白LOC677168 ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，微孔板预先包被人假定蛋白LOC677168特异性捕获抗体，待测样本中的靶蛋白可与固相抗体特异性结合；经过恒温孵育与洗涤纯化后，加入辣根过氧化物酶标记的LOC677168检测抗体，构建固相抗体-靶蛋白-酶标抗体的免疫复合物体系；后续通过底物显色、终止反应及吸光度检测，根据吸光度数值与标准曲线，定量测定样本中人假定蛋白LOC677168的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度 2.6pg/mL

检测范围：5.5~352pg/mL

反应时间：加样温育 80min，酶结合物孵育 40min，避光显色 14min

保存条件：试剂盒 2~8℃冷藏，浓缩洗涤液稀释后 4℃可保存 1 周

显色系统：HRP 介导 TMB 显色，硫酸终止显色

检测波长：450nm 单波长检测

标准曲线绘制：半对数线性拟合，横坐标标品浓度对数，纵坐标 OD 值绘制曲线

注意事项：样本稀释比例严格按照说明书；洗板机洗板防止孔内残留液体；显色时间严格把控
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。

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实验操作流程：

试剂盒室温复温 30min，取出固相板条，区分标准孔、样本孔、空白孔，每孔加入预处理样品 100μL，空白孔加稀释液。

无需弃液洗板，直接加入酶标记结合液 55μL，摇匀后封板封口。

37℃避光孵育 62min，禁止挪动酶标板以免打断抗原抗体结合。

开封弃液，每孔加满洗涤液浸泡 40s 后甩干，连续洗板 5 次，吸水纸吸干孔底残留液体。

每孔加显色 A、B 液各 50μL，遮光条件下 37℃显色 17min。

每孔加入终止液 50μL 混匀，终止酶催化反应。

酶标仪 450nm 读取吸光值，对照标准曲线计算 LOC677168 蛋白含量。