本试剂盒采用酶联免疫吸附试验间接法原理,预先将纯化的人唾液腺导管组织抗原包被于微孔板固相载体上,加入待测样本后,样本中特异性抗唾液腺导管组织抗体(SDA)可与固相抗原特异性结合,充分洗涤去除未结合杂质后,加入酶标记二抗与结合的一抗结合,再加入底物发生显色反应,最终通过酶标仪测定吸光度值,吸光度数值与样本中SDA抗体含量呈正相关,可精准判定样本中抗体水平。
基本参数:

产品名称:人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)ELISA试剂盒
英文名称:SDA Elisa Kit
货号:Y-E509
规格:48T/96T
灵敏度:最低可检测浓度<1.0 ng/mL
检测范围:0.156 ng/mL ~ 10 ng/mL
反应时间:样本孵育 60min,酶结合物孵育 30min,底物显色 15min
保存条件:未拆封试剂盒 2~8℃避光保存;开封后板条密封 2~8℃,有效期 1 个月
显色系统:TMB 单组分显色液,硫酸终止液终止反应
检测波长:主波长 450nm,参比波长 630nm
标准曲线绘制:以标准品浓度为 X 轴,OD 吸光度值为 Y 轴,四参数拟合生成标准曲线,样本浓度由曲线回算
注意事项:避免试剂交叉污染;洗板务必充分;终止后 15min 内完成读板
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 30min,取出酶标板,设定空白孔、阴性对照孔、阳性对照孔、待测样本孔,每孔标记区分。
空白孔不加任何液体,对照孔与样本孔每孔先加入对应稀释好的样本 / 标准品 50μL,随即立即加入酶结合工作液 50μL,封板膜密封微孔板。
轻轻震荡酶标板混匀孔内液体,37℃恒温孵育 60min。
撕去封板膜,弃去孔内全部液体,每孔加满洗涤液,浸泡 30s 后拍干,重复洗板 5 次,每次充分拍净孔内残留洗液。
所有孔依次加入显色底物 A 液 50μL、显色底物 B 液 50μL,避光轻柔混匀,37℃避光显色 15min。
每孔快速加入终止液 50μL,摇晃酶标板终止显色反应。
酶标仪 450nm 波长测定各孔 OD 吸光度值,根据标准品浓度曲线计算样本中 SDA 抗体含量。
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