本试剂盒采用经典双抗体夹心ELISA检测技术,酶标板微孔固定GEF特异性抗体,待测样本中的鸟苷酸交换因子与固相抗体特异性免疫结合,加入酶标记二抗形成夹心复合物,洗涤去除未结合物质后酶促底物显色,显色强度与样本中GEF含量成正比,通过标准曲线换算实现定量检测。
产品参数:
产品名称 | 人鸟苷酸交换因子(GEF)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2708 |
英文名称 | GEF ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:0.66 pg/mL
检测范围:3.2pg/mL~108pg/mL
反应时间:37℃孵育 84min,二抗 38min,显色 19min,总 141min
保存条件:2~8℃保存,标准品分装 - 20℃冻存
显色系统:单组份 TMB 显色,2M 硫酸终止
检测波长:450nm,参比 630nm
标准曲线绘制:6 点四参数 Logistic 曲线绘制
注意事项:加样时避免产生气泡,气泡会干扰酶标仪读数
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
样本处理:裂解液样本高速离心去除沉淀,稀释待测样本;梯度稀释 GEF 标准品。
板孔加样:各微孔依次加入标准品、待测样本、空白试剂 100μL。
一步共加酶抗:每孔加入酶标记抗 GEF 抗体 100μL,密封板膜。
恒温孵育:37℃避光孵育 61min。
洗板去污:倒掉废液,洗液浸泡 25s 拍干,连续洗涤 4 次。
TMB 显色:添加显色 A、B 液各 50μL,暗处显色 14min。
终止检测:终止液终止反应,450nm 测定吸光度,计算 GEF 浓度。
关键字: 人鸟苷酸交换因子;GEF;ELISA试剂盒;
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