中文名:JC-10线粒体膜电位荧光探针溶液
英文名:JC-10 Mitochondrial Membrane Potential Fluorescent Probe Solution
纯度:BioReagent,生物染色剂,适用于荧光分析,2 mg/ mL in DMSO,Fluorescence Analysis
货号:J1527591
Cas号:5563-28-0
存储温度:-20°C储存
运输条件:超低温运输
稳定性存储:Store at -20℃ long term (36 months). Store in the dark.
产品介绍:
JC‑10 是一种用于检测线粒体膜电位(ΔΨm)的理想荧光探针。当线粒体膜电位较高时,JC‑10 在线粒体基质中聚集,发出红色荧光;当膜电位较低时,JC‑10 以单体形式存在,发出绿色荧光。JC‑10 可选择性地进入线粒体,并随膜电位升高发生可逆的荧光颜色转变(绿色→橙红色)。与 JC‑1 相比,JC‑10 的水溶性更优,而荧光性质相近,因此是 JC‑1 的卓越替代品。
产品用途
仅供科研使用,广泛用于细胞生物学、分子生物学、药理学等研究领域,严禁用于人体。JC‑10 适用于检测细胞、组织或分离线粒体的膜电位变化。
物理性质及指标
外观:液体
分子式: C₂₅H₂₉Cl₂IN₄
分子量:583.34
CAS No.:5563-28-0
浓度:2 mg/mL,相当于3 mM
澄清度:DMSO 中澄清,无杂质
Ex/Em(nm):490/525 nm (单体-绿色);490/590 nm (聚集体-橙红色)
储存条件:-20℃保存,避光、防潮、密封
使用方法:(仅供参考)
一、工作液配制
将 JC-10 溶液回温至室温,用 HBSS(Hanks' Balanced Salt Solution with HEPES)或其他缓冲液,加入 0.02% Pluronic F-127,稀释至终浓度 5~30 μM,涡旋混匀。
二、样品实验方案
• 酶标仪检测
(1)使用待测化合物处理细胞至预定时间诱导凋亡(示例:Jurkat 细胞可采用喜树碱处理 4~6 小时),阴性对照孔(细胞 + 溶剂对照),背景空白孔(无细胞,仅培养基);
(2)对于贴壁细胞,染色前需移除培养基;对于悬浮细胞,染色前离心去除培养基;
(3)96 孔板中每孔加入 100 μL JC-10 工作液;384 孔板中每孔加入 25 μL 工作液;
(4)37℃、5% CO₂培养箱中避光孵育 15~60 min;
注:孵育时间需根据具体细胞类型和浓度进行优化,建议每次实验前确定最佳孵育时长。
【可选】移除 JC-10 工作液后,96 孔板每孔加入 100 μL HHBS 缓冲液(384 孔板 25μL / 孔),再进行检测分析;
(5)在激发 / 发射 = 490/525 nm 和 490/590 nm 处监测荧光变化进行比率分析。
• 荧光显微镜或流式细胞仪检测
(1)使用测试化合物处理细胞至预定时间诱导凋亡(示例:Jurkat 细胞可采用喜树碱处理 4~6 小时);
(2)离心细胞,调整密度至每管 1~5×10⁵个;
(3)使用 500 μL JC-10 工作液重悬细胞;
(4)室温或 37℃避光孵育 10~60min;
注:孵育时间需根据具体细胞类型和浓度进行优化,建议每次实验前确定最佳孵育时长。
【可选】离心移除 JC-10 工作液后,加入适量 HHBS 缓冲液重悬细胞,再进行检测分析;
(5)使用荧光显微镜(FITC/TRITC 滤光片组)或流式细胞仪(FL1/FL2 通道),在激发 / 发射波长 490/525 nm 和 490/590 nm 下监测荧光变化。
注意
1.荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4.部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。
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