基因敲低细胞（knockdown, KD）和基因敲除细胞（knockout, KO）定制

一、细胞基因敲低（knockdown, KD）

细胞基因敲低作为一种高效、精准的基因功能研究手段，不仅是解析生命本质的核心手段，也是推动生物医药、细胞治疗与工程细胞株优化的关键技术平台。其在基础研究、疾病建模、细胞工程与临床转化中的研究价值将持续扩大。

主流方法 CRISPR/Cas9系统敲除：该方法使用CRISPR/Cas9系统，通过设计gRNA靶向目的基因序列，可对靶向的片段进行切除。在细胞的修复过程中，由于原本片段被切除，会在切除片段处出现基因的缺失或突变，从而导致靶向基因的失活。

基因敲低细胞系（Gene Knockout Cell Line）是指在特定细胞中人为删除或失活某个基因，从而使该细胞不再表达该基因编码的蛋白质的细胞系。这种细胞系常用于研究该基因的功能，以及它在细胞生理、生化途径、疾病机制中的作用。常用的方法如CRISPR-Cas9技术：利用Cas9核酸酶在目标基因处产生双链断裂，随后通过非同源末端连接（NHEJ）导致框移突变，使基因失活。

细胞基因敲低技术方案:

二、细胞基因敲除

基因敲除细胞系(Gene Knockout Cell Line)指利用CRISPR-Cas9等技术，在基因组层面永久删除或失活目标基因，使细胞完全丧失该基因编码蛋白的表达。这类细胞系是解析基因功能、信号通路及疾病机制的核心工具。

三、基因敲除与敲低，怎么选？

基因敲低（KD）一般通过RNA干扰（RNAi）技术特异性降解靶基因mRNA，从而抑制基因表达的生物工程技术。该技术利用双链小RNA与靶基因mRNA的同源序列结合，经RISC复合体切割导致mRNA降解，实现基因表达阻断。与基因敲除不同，基因敲低不改变基因组DNA序列，仅暂时下调基因表达水平且不可遗传。

基因敲低和基因敲除差异：

附：CRISPR-HD™敲除——永久、彻底、可重复；

siRNA-Pro™敲低——快速、可控、可诱导。

四、联系方式

电话：13155297675（企业微信同号） | 邮箱：wuhan_institute@elevin.cn

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