产品名称 | 大鼠视网膜Muller细胞 | 组织来源 | 视网膜组织 |
英文名称 | Rat Retinal Muller Cells | 种属 | SD大鼠 |
规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | CS-X3058 |
方法简介 实验室分离的大鼠视网膜Muller细胞采用胶原酶消化法和胰蛋白酶反复消化法制备而来。
质量检测 实验室分离的大鼠视网膜Muller细胞经GS免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基： 大鼠视网膜Muller细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 梭形、多角形
传代比例： 1:2
传代特性： 可传2-3代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠视网膜Muller细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
前置准备
实验动物：SD大鼠，取脑组织或脊髓组织
试剂：0.25%胰蛋白酶、II型胶原酶、DNase I、DMEM/F12培养基、胎牛血清(FBS)、PBS缓冲液、DMEM/F12培养基、FBS、EGF、FGF-b、PDGF-AA
分离纯化步骤
取实验动物脑组织或脊髓组织，用预冷PBS冲洗去除血液
去除脑膜和血管组织，将目标区域剪碎至1mm3
用0.25%胰蛋白酶消化20分钟，再加入II型胶原酶消化30分钟
过滤后300g离心8分钟收集细胞，重悬于含EGF和FGF-b的培养基中
采用磁珠分选或差速培养法富集目标胶质细胞类型
原代培养要点
胶质细胞(星形胶质细胞/少突胶质细胞/小胶质细胞)培养条件略有差异
星形胶质细胞：DMEM/F12+10%FBS，37度、5% CO2，细胞呈多角形贴壁生长
少突胶质细胞：需PDGF-AA维持增殖，分化期添加T3、甲状腺素促进成熟
小胶质细胞：采用振荡分选法从混合胶质细胞中分离，悬浮或弱贴壁生长
常见问题优化
胶质细胞交叉污染：采用免疫磁珠分选可提高纯度至90%以上
少突胶质细胞分化率低：添加C57条件培养基或IBMX可促进少突胶质细胞成熟
小胶质细胞活化：避免过度培养，原代培养5代以内保持静息态表型
大鼠电压依赖性阴离子通道蛋白1(VDAC1)elisa试剂盒 | 143B 人骨肉瘤细胞 |
大鼠维生素D(VD)elisa试剂盒 | 人硬脑膜成纤维细胞 |
大鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1;CD106)elisa试剂盒 | 人表皮干细胞 |
大鼠维生素B9(VB9)elisa试剂盒 | WISH (人羊膜细胞) (Hela污染细胞系，暂不供应) |
大鼠Adropin蛋白(AD)elisa试剂盒 | 人食管鳞癌细胞Kyse520 (STR鉴定正确) |
大鼠AFB1-DNA加合物(AFB1-DNA)elisa试剂盒 | 人胰腺腺泡上皮细胞 |
猪胰蛋白酶（Try）elisa试剂盒 | 兔原代滑膜间充质干细胞 |
SW620+GFP人结直肠腺癌+GFP细胞专用培养基 | IQCA1L基因过表达细胞株 |
SK-MEL-2+LUC人皮肤黑色素瘤荧光素酶标记细胞专用培养基 | FAM131A基因过表达细胞株 |
人原代肾间质成纤维细胞专用培养基 | ZNF526基因过表达细胞株 |
2BS细胞专用培养基 | DCAF10基因过表达细胞株 |
人原代皮脂腺癌细胞专用培养基 | PRDM13基因过表达细胞株 |
大鼠视网膜Muller细胞SUP-B15细胞专用培养基 | CD34基因过表达细胞株 |
5-8F细胞专用培养基 | ZNF574基因过表达细胞株 |
前期准备：多聚赖氨酸包被培养板，预热Muller细胞专用培养基、预冷无菌HBSS、复合消化酶，显微解剖器械灭菌备用。
无菌取材：无菌摘取大鼠眼球，剪开眼球壁，完整剥离视网膜组织，剔除玻璃体、色素上皮及脉络膜组织，预冷HBSS漂洗。
组织处理：冰上剪碎视网膜组织为细小碎片，轻柔吹打分散，去除残留透明玻璃体杂质。
酶解消化：复合消化酶37℃消化15min，间断轻柔吹打，充分解离视网膜Muller细胞。
终止过滤：专用培养基终止消化，过滤去除组织大块残渣，收集细胞悬液。
离心重悬：1100rpm离心5min，弃上清，新鲜培养基温和重悬细胞沉淀。
接种培养：均匀接种，静置培养24h换液，后续每2d换液，通过培养条件纯化Muller胶质细胞。
关键字： 大鼠视网膜Muller细胞;视网膜组织;
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