产品名称 | 大鼠小肠Cajal间质细胞 | 组织来源 | 小肠组织 |
英文名称 | Interstitial Cells of Cajal from Rat Small Intestine | 种属 | SD大鼠 |
规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | CS-X3249 |
方法简介 实验室分离的大鼠小肠Cajal间质细胞采用胶原酶消化法结合组织贴块法制备而来。
质量检测 实验室分离的大鼠小肠Cajal间质细胞经c-kit免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基： 大鼠小肠Cajal间质细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 不传代
传代特性： 不建议传代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠小肠Cajal间质细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
前置准备
实验动物：SD大鼠，取目标组织
试剂：0.25%胰蛋白酶、II型胶原酶、DNase I、DMEM/F12培养基、胎牛血清(FBS)、PBS缓冲液、相应专用培养基组分
分离纯化步骤
取实验动物目标组织，用预冷PBS冲洗去除血液和杂质
剪碎组织后采用胶原酶消化法(37度、1-2小时)分散细胞
过滤后300g离心8-10分钟收集细胞
根据细胞类型采用适当方法进一步纯化(密度梯度离心/免疫磁珠分选/差速贴壁)
原代培养要点
将纯化后的细胞接种于适当包被的培养皿中
使用含10%FBS的DMEM/F12完全培养基，37度、5% CO2培养
每2-3天换液一次，根据细胞生长特性调整培养条件
常见问题优化
细胞得率低：根据组织特性优化消化时间和酶浓度
细胞纯度不高：采用多种纯化方法联合使用提高纯度
细胞表型维持：控制传代次数，必要时采用特殊培养基或包被基质
大鼠维生素A(VA)elisa试剂盒 | A549+RFP 人肺癌细胞+RFP |
大鼠三磷酸尿苷(UTP)elisa试剂盒 | 人脾星状细胞 |
大鼠尾加压素II(Urotensin II)elisa试剂盒 | 人脂肪细胞 |
大鼠尿酸氧化酶(Uricase)elisa试剂盒 | COLO 201 (人结直肠腺癌细胞) |
大鼠ATP结合盒转运体A1(ABCA1)elisa试剂盒 | 人急性髓系细胞白血病细胞KG-1A(STR鉴定正确) |
大鼠ATP-柠檬酸裂解酶(ACLY)elisa试剂盒 | 人支气管上皮细胞 |
猪血小板生成素（TPO）elisa试剂盒 | 兔原代垂体细胞 |
MA-891小鼠乳腺癌高转移细胞专用培养基 | ZNF408基因过表达细胞株 |
smmc-7721人肝癌细胞专用培养基 | ASPG基因过表达细胞株 |
兔原代肝间质细胞专用培养基 | AKAP8基因过表达细胞株 |
A-253细胞专用培养基 | NPHP1基因过表达细胞株 |
人原代脉络膜微血管内皮细胞专用培养基 | JHY基因过表达细胞株 |
大鼠小肠Cajal间质细胞SW620+GFP细胞专用培养基 | GDAP2基因过表达细胞株 |
A431细胞专用培养基 | ACVR1C基因过表达细胞株 |
前期准备：无菌包被培养板，预热ICC专用培养基、预冷HBSS、复合消化酶，无菌低温精细操作。
无菌取材：无菌剥离大鼠小肠组织，冲洗肠腔内容物，剔除肠系膜与脂肪组织，保留肠壁肌层组织。
组织处理：HBSS漂洗肠壁组织，剪碎为细小碎片，去除黏膜层杂质，富集肌层间质组织。
酶解消化：复合酶液37℃消化17min，间断轻柔吹打，解离Cajal间质细胞。
终止过滤：专用培养基终止消化，过滤去除组织残渣与杂质。
离心重悬：1000rpm离心5min，弃上清，ICC专用培养基温和重悬细胞。
接种培养：低密度接种，静置培养48h换液，后续定期换液，纯化间质细胞。
关键字： 大鼠小肠Cajal间质细胞;小肠组织;
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