产品名称 | 人牙髓干细胞 | 组织来源 | 牙髓组织 |
英文名称 | Human Dental Pulp Stem Cells | 种属 | 人 |
规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | CS-X3349 |
方法简介 实验室分离的人牙髓干细胞采用胶原酶消化法、低密度稀释克隆制备而来。
质量检测 实验室分离的人牙髓干细胞经CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基： 人牙髓干细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3-5代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
人牙髓干细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
前置准备
实验动物：健康成人供体，取材需严格无菌操作
试剂：0.25%胰蛋白酶、I/II型胶原酶、DNase I、M199培养基、胎牛血清(FBS)、PBS缓冲液、MSC专用培养基/干细胞专用培养基、FBS、beta-巯基乙醇、L-谷氨酰胺
分离纯化步骤
从实验动物目标组织(骨髓/脂肪/脐带/牙髓等)中分离间充质成分
组织剪碎后经胶原酶消化(37度、2小时)，过滤获取单细胞悬液
采用密度梯度离心(Ficoll)纯化单个核细胞层
将细胞接种于培养皿中，间充质干细胞24-48小时贴壁，非贴壁细胞换液去除
贴壁细胞扩大培养至60-70%融合后，流式分选CD90+/CD105+/CD34-/CD45-细胞
原代培养要点
干细胞培养需使用专用培养基(含20%FBS的MSC培养基或DMEM/F12+20%FBS)
接种密度建议5x10^3-1x10^4 cells/cm2，37度、5% CO2培养
每2-3天换液一次，间充质干细胞呈梭形贴壁生长，融合达80%时传代
干细胞具有三系分化潜能，可在诱导培养基中向成骨/成脂/成软骨方向分化
常见问题优化
干细胞增殖缓慢：添加FGF-2(10ng/mL)和EGF(10ng/mL)可促进增殖
干细胞分化潜能下降：控制传代次数在3-5代以内，避免过度扩增
细胞纯度不高：采用流式分选CD90+/CD105+双阳性标记可提高纯度
大鼠转胶蛋白2(TAGLN2)elisa试剂盒 | TCCSUP人膀胱癌细胞 |
大鼠TAK1结合蛋白2(TAB2)elisa试剂盒 | 小鼠肛门内括约肌平滑肌细胞 |
大鼠四碘甲状腺原氨酸(T4)elisa试剂盒 | 小鼠小肠平滑肌细胞 |
大鼠可溶性α–klotho蛋白(sα-klotho)elisa试剂盒 | P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤细胞) (种属鉴定正确) |
大鼠N端中段骨钙素(N-MID-OT)elisa试剂盒 | 人淋巴内皮细胞HLEC(STR鉴定正确) |
大鼠N-花生四烯酸氨基乙醇(anandamide)elisa试剂盒 | 兔胎盘绒毛膜滋养层细胞 |
猪三叶因子3（TFF3）elisa试剂盒 | 人原代主动脉血管平滑肌细胞 |
thp-1人单核白血病细胞专用培养基 | KIF2B基因过表达细胞株 |
RBL-2H3大鼠嗜碱性白血病细胞专用培养基 | CHRDL1基因过表达细胞株 |
兔原代胸腺上皮细胞专用培养基 | ACSM5基因过表达细胞株 |
HCC827 细胞专用培养基 | AGAP6基因过表达细胞株 |
大鼠原代胰腺导管上皮细胞专用培养基 | ALPL基因过表达细胞株 |
人牙髓干细胞大鼠原代脐静脉内皮细胞专用培养基 | EVX2基因过表达细胞株 |
HCT116+GFP细胞专用培养基 | SLC45A1基因过表达细胞株 |
冻存管 37℃水浴快速解冻，少量冰晶残余即取出。
酒精擦拭外壁，超净台将细胞悬液转移离心管。
1000rpm 离心 5min，弃上清废液。
牙髓干细胞专用完全培养基轻柔吹打重悬细胞。
细胞计数，按干细胞适宜密度接种培养瓶。
37℃、5% CO₂培养箱静置，24h 镜下观察贴壁。
汇合度 70‑80% 更换新鲜培养基，及时传代，干细胞禁止长满。
关键字： 人牙髓干细胞;牙髓组织;
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