产品名称 | 兔胰腺星状细胞 | 组织来源 | 胰腺组织 |
英文名称 | Rabbit Pancreatic Stellate Cells | 种属 | 新西兰大白兔 |
规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | CS-X2872 |
方法简介 实验室分离的兔胰腺星状细胞采用胶原酶消化法制备而来。
质量检测 实验室分离的兔胰腺星状细胞经α-SMA或Desmin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基： 兔胰腺星状细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3-5代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔胰腺星状细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
前置准备
实验动物：新西兰大白兔，取胰腺/睾丸/肾上腺等内分泌腺体
试剂：0.25%胰蛋白酶、II型胶原酶、DNase I、DMEM/F12培养基、胎牛血清(FBS)、PBS缓冲液、DMEM/F12培养基、FBS、PBS
分离纯化步骤
取实验动物目标内分泌腺体组织，仔细去除周围结缔组织
剪碎组织后采用胶原酶消化法(37度、45-60分钟)分散细胞
经滤网过滤后，采用密度梯度离心纯化目标细胞
胰岛细胞可采用Handy solution差速沉淀法进一步纯化
原代培养要点
胰岛beta细胞：使用CMRL-1640+10%FBS+10mM HEPES+50uM beta-巯基乙醇
睾丸间质细胞：使用DMEM/F12+10%FBS+0.1% BSA培养
肾上腺皮质细胞：使用DMEM/F12+5%FBS+0.1uM地塞米松培养
常见问题优化
胰岛细胞纯度不高：采用Handy solution梯度离心可获得纯度>90%的胰岛细胞
内分泌细胞功能维持：添加相应激素(如IGF-1、IGF-2)可维持细胞功能
细胞存活率低：培养基中添加抗坏血酸和转铁蛋白可提高存活率
大鼠可溶性白介素6受体(sIL-6R)elisa试剂盒 | LP-1多发性骨髓瘤 |
大鼠可溶性白介素1受体1(sIL-1R1)elisa试剂盒 | 小鼠视网膜前体细胞 |
大鼠分泌型免疫球蛋白G(sIgG)elisa试剂盒 | 小鼠角膜上皮细胞 |
大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)elisa试剂盒 | 小鼠肺血管平滑肌细胞 |
大鼠α-球蛋白(α-GLB)elisa试剂盒 | 大鼠肝Kupffer细胞 |
大鼠α肾上腺素能受体(αAR)elisa试剂盒 | 人气管上皮细胞 |
猪硫酸皮肤素（DS）elisa试剂盒 | 小鼠原代胎盘绒毛膜滋养层细胞 |
SNB-19人脑胶质瘤细胞专用培养基 | UTP25基因过表达细胞株 |
RT4人膀胱移行乳头瘤细胞专用培养基 | VWA5A基因过表达细胞株 |
大鼠原代眼微血管内皮细胞专用培养基 | PIK3R6基因过表达细胞株 |
兔原代甲状旁腺细胞专用培养基 | ACP4基因过表达细胞株 |
人原代肾上腺包膜成纤维细胞专用培养基 | ENO4基因过表达细胞株 |
兔胰腺星状细胞SKNO-1细胞专用培养基 | ERVFRD-1基因过表达细胞株 |
大鼠原代小肠隐窝上皮细胞专用培养基 | EGR3基因过表达细胞株 |
1. 细胞复苏：取出冻存兔胰腺星状细胞冻存管，37℃水浴快速融化冻存液，少量冰晶留存时取出冻存管，酒精擦拭管壁，安全柜中将细胞悬液缓慢转移至含有专用完全培养基的离心管。
2. 离心去除冻存保护试剂：离心管配平，1000rpm 离心 5min，离心完成，小心吸弃上层冻存上清，不要扰动管底星状细胞沉淀。
3. 重悬打散细胞沉淀：加入预热兔胰腺星状细胞完全培养基，轻柔反复吹打管底沉淀，打散细胞团块，制备成均匀单细胞悬液，减少机械损伤。
4. 计数接种至培养器皿：活细胞计数，按照标准接种密度接种细胞培养瓶，接种完成后十字晃动培养瓶，使细胞均匀分布瓶底。
5. 培养箱静置贴壁孵育：将培养瓶平稳放置于 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，静置孵育 24h，不移动培养瓶，保障星状细胞贴壁活化。
6. 初次换液去除悬浮杂质：孵育 24h 后镜检细胞贴壁状态，弃除旧培养基，去除悬浮死细胞碎片，添加预热新鲜完全培养基放回培养箱。
7. 维持培养传代处理：后续每 2‑3 天更换培养基，观察星状细胞活化形态，细胞汇合 80‑85%，进行胰酶消化传代，用于胰腺纤维化相关体外实验。
关键字： 兔胰腺星状细胞;胰腺组织;
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