GIP 人胃抑素ELISA试剂盒

试剂盒预先包被GIP 人胃抑素捕获抗体的微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤后,用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,在酸的作用下最终转化为黄色,颜色深浅与样本中GIP的含量呈正相关。
产品名称 | GIP 人胃抑素ELISA试剂盒 | 规格 | 48T/96T |
英文名称 | GIP ELISA Kit | 货号 | BKE8013 |
保存条件 | 2~8℃低温冷藏 | 保质期 | 6个月 |

第一阶段:准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温:从冰箱取出试剂盒,将所有试剂(包括浓缩洗涤液、标准品、样本等)在室温(20-25℃)下平衡至少 30分钟。
注意:如果浓缩洗涤液有结晶,需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释:按照说明书要求,使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释(通常做7-8个浓度点),现配现用。
样本处理:确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀(如有沉淀需再次离心)。
第二阶段:加样与孵育
加样:
在酶标板的对应孔中,分别加入 100 μL(具体体积看说明书)稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔(只加稀释液)。
建议:每个样本做2-3个复孔,数据更可靠。
孵育:
盖上封板膜,放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时(或按说明书要求,如室温2小时)。
原理:让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段:洗板与检测抗体
洗板(关键步骤):
弃去孔内液体,每孔加满洗涤液(约300-350 μL),静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干,确保无残留液体。
加检测抗体:
每孔加入 100 μL 稀释好的检测抗体工作液(生物素化抗体)。
盖上封板膜,37℃ 孵育 1小时。

关键点 说明
洗板 洗板不彻底是背景值高(花板)的主要原因。务必浸泡并拍干。
防污染 加样时枪头不要混用,避免交叉污染导致假阳性。
气泡 加样和洗板时避免产生气泡,气泡会干扰酶标仪读数。
时间控制 加样和加终止液的动作要快,尽量控制整板操作时间差在5-10分钟内。

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