产品名称 | 兔胰腺腺泡细胞 | 组织来源 | 胰腺组织 |
英文名称 | Rabbit Pancreatic Acinar Cells | 种属 | 兔 |
规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | CS-X3770 |
方法简介 实验室分离的兔胰腺腺泡细胞采用胶原酶-中性蛋白酶联合消化结合差速贴壁法，并通过专用培养基培养筛选制备而来。
质量检测 实验室分离的兔胰腺腺泡细胞经特异性标志物免疫荧光鉴定，纯度可达85%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件： 鼠尾胶原Ⅰ（2-5 μg/cm²）
培养基： 兔胰腺腺泡细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 上皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传2-3代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔胰腺腺泡细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
前置准备
实验动物：2-3月龄新西兰大白兔，体重2.0-2.5kg，每只可获得1.5-3.0×10⁶个细胞，活力>88%
试剂：胶原酶Type I、Dispase II、胰蛋白酶、Hanks平衡盐溶液、DMEM高糖培养基
分离纯化步骤
组织块经Hanks液反复冲洗后剪碎，加入胶原酶Type I、Dispase II、胰蛋白酶、Hanks平衡盐溶液于37℃水浴消化30-60分钟，期间间歇振荡
滤过100目滤网后的细胞悬液加入等体积含10% FBS的培养基终止消化，400g离心10分钟
利用免疫磁珠分选技术（MACS）纯化目标细胞，纯度可达88%以上
原代培养要点
细胞重悬于完全培养基中，按3×10⁴密度接种，置于37℃、5% CO₂恒温培养箱
细胞贴壁后呈典型形态，生长速率适中，每3-5天传代一次，传代后活力保持良好
常见问题优化
细胞形态异常：检查培养基pH值和渗透压，避免过度传代导致细胞老化
培养过程中出现污染：严格无菌操作，培养基中添加适量抗生素，定期检测支原体
目标细胞占比低：优化消化条件提高目标细胞得率，改进分离策略减少非目标细胞污染
大鼠神经生长因子受体(NGFR)elisa试剂盒 | XWLC-05人肺腺癌细胞 |
大鼠核因子κB1(NF-κB1)elisa试剂盒 | 小鼠子宫成纤维细胞 |
大鼠核因子κB(NF-κB)elisa试剂盒 | 小鼠输尿管平滑肌细胞 |
大鼠神经丝蛋白多肽(NFL)elisa试剂盒 | 小鼠胃成纤维细胞 |
大鼠谷胱甘肽S转移酶(GST)elisa试剂盒 | 小鼠心肌干细胞 |
大鼠谷胱甘肽S转移酶α5(GSTa5)elisa试剂盒 | 小鼠脾淋巴细胞 |
小鼠自然细胞毒性触发受体（NKP46）elisa试剂盒 | 小鼠输尿管成纤维细胞 |
MEF小鼠胚胎成纤维细胞专用培养基 | DUX4基因过表达细胞株 |
SU-DHL-4人B淋巴瘤 细胞专用培养基 | CYP4B1基因过表达细胞株 |
兔原代外根鞘细胞专用培养基 | PDZD4基因过表达细胞株 |
A673细胞专用培养基 | ATP6V1C2基因过表达细胞株 |
人原代颈动脉平滑肌细胞专用培养基 | SLC15A2基因过表达细胞株 |
兔胰腺腺泡细胞TC-1细胞专用培养基 | BTBD16基因过表达细胞株 |
AIM-V细胞培养基 | GJA3基因过表达细胞株 |
一、实验前准备
1. 手术剪、镊子、培养耗材高压灭菌；超净台紫外通风30min。
2. 配制灌洗液 冰预冷D-Hanks液、消化液（胶原酶Ⅳ、透明质酸酶、胰蛋白酶）、DMEM/F12 + 10% FBS + 1% 双抗、双抗。
3. 健康新西兰大白兔（2.0-2.5kg），3%戊巴比妥钠耳缘静脉注射，冰浴预冷所有缓冲液。
二、取材与预处理
1. 空气栓塞法处死，75%酒精浸泡消毒体表，无菌操作下暴露并摘取目标。
2. 置于冰预冷D-Hanks液中反复漂洗，去除血污及附属组织，仔细剔除结缔组织。
3. 将纯化后的目标组织用眼科剪尽量剪碎，尽量减小组织块大小以利消化。
三、细胞分离与消化
1. 组织碎块与胶原酶Ⅳ+透明质酸酶+胰蛋白酶混合酶液按1:3比例混合，37℃振荡消化38min。
2. 加入含20% FBS的培养基中和酶活性，反复吹打使组织充分分散。
3. 细胞悬液经40μm滤网过滤，1次200g×10min离心洗涤，收集细胞。
四、纯化与接种培养
1. 细胞悬液经40μm滤网过滤，采用适当纯化方法去除杂质细胞，去除未消化组织块。
2. 用DMEM/F12 + 10% FBS + 1% 双抗调整细胞浓度至130000.0cells/mL，接种于预涂明胶的培养皿中。
3. 置于37℃、5% CO2培养箱中培养，每2-3天换液一次，倒置显微镜下观察细胞贴壁及形态因细胞类型而异，贴壁或悬浮生长。
关键字： 兔胰腺腺泡细胞;胰腺组织;
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