描述:在实体组织和细胞内,胆固醇酯既是构成细胞质膜的成分,也是细胞内脂滴的主要组分。细胞内胆固醇过度聚集与动脉粥样硬化泡沫细胞形成密切相关。实体组织和细胞的胆固醇测定远比与血液胆固醇测定复杂。试剂盒避免了有毒的有机溶剂抽提、繁杂的氮气吹干和脂质复溶等步骤,采用高效能试剂裂解细胞和提取胆固醇,优化酶学反应和操作步骤。简单易行,灵敏度高,线性范围20~5000 µmol/L。 原理:采用WHO、中国《全国临床检验操作规程》推荐的酶学方法,结合经典GPO Trinder酶学反应1:(1) 胆固醇酯酶分解胆固醇酯为游离胆固醇。(2) 胆固醇氧化酶将游离胆固醇氧化。(3) 反应过程产生过氧化氢。(4) 在过氧化物酶催化下进行生色反应,在550nm有吸收峰,光密度值与胆固醇浓度成正比。 适于测定样品 (1) 动物实体组织 (2) 培养细胞 (3) 细胞膜组分 组成 (105次微板测定或30次1 ml比色杯测定) (1) 裂解液 100 ml (2) R1试剂 16 ml (3) R2试剂 4 ml (4) 5 mmol/L胆固醇标准品0.5 ml 4 ºC,避光储存3个月。 所需设备:酶标仪、生化分析仪或721、722型可见光分光光度计。96孔微板或比色杯光径1cm。工作波长550nm,如无此波长建议优先选用570nm、次选530、490nm。
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