产品描述
Taq DNA Ligase是一种耐高温连接酶,它能催化与同一互补靶DNA链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5´-磷酸和3´-羟基之间形成磷酸二酯键。该催化反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对,且两条寡核苷酸链之间没有间隙的条件下才会发生。因此,可以用它来检测单碱基替换。Taq DNA连接酶以NAD+为辅酶因子,在45℃-65℃范围内均有活性。
产品组分
编号
组 分
产品编号/规格
11051ES80 (1000 U)
11051ES84 (2000 U)
11051ES92 (10000 U)
11051-A
Taq DNA Ligase(40 U/µL)
25 μL
50 μL
50 μL×5
11051-B
10×Taq DNA Ligase Buffer(含NAD+)
250 μL
500 μL
500 μL×5
来源
重组E. coli 菌株,含有从Thermus aquaticus HB8中克隆的连接酶基因。
产品应用
1)用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测;
2)通过PCR扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变;
3)同源重组。
单位定义
在50 μL 反应体系中,45℃条件下,孵育15 min能使50%的1 μg经BstEII消化的λDNA片段(12 bp粘性末端)发生连接所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制
核酸内切酶活性:在50 μL反应体系中,10 μL酶溶液与0.5 μg pENZuC DNA作用,37℃孵育4 h,经琼脂糖凝胶电泳,无肉眼可见的环状切口DNA出现。
核酸外切酶活性:在50 μL反应体系中,10 μL酶溶液和10000 cpm/μg放射性标记的DNA作用,37℃孵育4 h,溶液中可溶性TCA的释放量小于5.0%。
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存。长时间(大于30天)保存时,缓冲液应于-80℃保存。
上海翊圣生物科技有限公司
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