人多能干细胞分化培养基
产品基本信息
Applied CellTM人多能干细胞（ES/iPS）分化培养基
基础培养基2-8℃，添加剂-20～-80℃；
混匀后2-8℃，2周内使用完毕。
产品简介
人多能干细胞分化培养基是埃泽思生物科技有限公司（Applied CellTM）研发的一款适用于人多能干细胞诱导分化的培养基。该培养基可用于EB（拟胚体）的形成。拟胚体是人多能干细胞在悬浮培养条件下形成的球状结构，可用于细胞多能性检测，形成拟胚体可验证细胞分化潜能。
产品特性
产品内容
hPSC Differentiation Basal Medium
人多能干细胞分化基础培养基
hPSC Differentiation Supplement
人多能干细胞分化添加剂
相关产品
人多能干细胞培养基（Applied CellTM: Cat. no.AC-1001000）
Advance人多能干细胞培养基（Applied CellTM: Cat. no.AC-1001001）
人多能干细胞分化培养基（Applied CellTM: Cat. no.AC-1001002）
人多能干细胞无酶消化液（Applied CellTM: Cat. no.AC-1001008）
即用型基质胶（Applied CellTM: Cat. no.AC-1001007）
人iPS细胞（Applied CellTM: Cat. no.AC-2001001）
人ES细胞（Applied CellTM: Cat. no.AC-2001002）
操作方法
实验准备
人多能干细胞分化培养基配制：
1.1 在2-8℃解冻人多能干细胞分化添加剂，轻晃摇匀；
1.2 随后将添加剂加入到人类多能干细胞分化基础培养基中（每10mL添加剂与500mL分化基础培养基彻底混合）混匀即为人多能干细胞分化培养基（AC-1001002）。人多能干细胞分化培养基可在2-8℃稳定储存2-3周。
注意：
1. 人多能干细胞分化添加剂只能在2-8℃解冻，可按实际用量对添加剂进行分装，分装后立即使用或储存于-20℃至-80℃保存。
2. 人多能干细胞分化培养基使用前建议在室温平衡10-20min，不建议在37℃加热。
实验操作(以6孔板为例)
2.1 在显微镜下观察人多能干细胞，确认细胞汇合度达到70–80%，准备传代。
2.2 清洗：拿出培养板,吸掉原有培养基，沿培养皿边缘缓慢加入37℃预热PBS缓冲液，轻轻晃动冲洗，然后吸去PBS缓冲液；
2.3 消化：在培养板中加入1.5mL人多能干细胞无酶消化液（AC-1001008）使之覆盖皿
底，并置于37℃，5%CO2培养箱中孵育2~5 min；
2.4 吹打：吸掉人多能干细胞消化液（AC-1001008）后，立刻加入室温平衡好的人
多能干细胞分化培养基，用移液枪扇形吹打培养皿底，吹打次数保持在
3~5次，使皿底贴附的干细胞集落脱落，轻柔缓慢吹吸混匀，制成干细胞悬液；
注意：吹吸皿底细胞的力度要轻柔，吹打脱落和吹吸混匀的次数在3~5次为宜，尽量避免形成单细胞。如有少量细胞无法从皿底脱落，属于正常现象。如有大量细胞无法从皿底脱落，需延长消化时间。
3.5制备拟胚体
3.5.1悬滴培养法制备拟胚体
稀释：将细胞悬液稀释，细胞密度约为1-2×105cells/mL；
制备悬滴：将稀释好的细胞悬液以30-50uL/滴(3000-7000 cells/滴),均匀接种在培养皿皿盖内面，翻转培养皿盖将其扣回加有PBS的培养皿上（加入PBS防止悬滴蒸发），放入37℃，5%CO2箱中培养；
3-4天后，非贴壁型培养皿中预先加入人多能干细胞分化培养基，将培养皿盖上的悬滴转移至培养皿中（6cm培养皿加入3-4mL培养基)中，可观察到明显的拟胚体结构，轻轻晃动培养皿使拟胚体均匀分布在培养皿中继续培养。
3.5.2悬浮培养法制备拟胚体
3.6换液
换液频率：使用悬滴法制备拟胚体,将悬滴接入非贴壁型培养皿继续培养后，每2-3天换一次液；使用悬浮培养法制备拟胚体，大约在第3天形成明显的拟胚体结构，可进行初次换液，后续每2-3天换一次液;
换液方法：将需换液的拟胚体悬液转移至15mL/50mL离心管中，静置约3min,待拟胚体沉降至管底，吸掉上清，加入室温平衡好的人多能干细胞分化培养基，用巴士滴管轻轻转移至非贴壁型培养皿中，轻轻晃动培养皿使之均匀分布在培养皿中，37℃，5%CO2培养箱中继续培养。
质量控制
关键字： 多能干细胞、多能干细胞分化培养基;
上海埃泽思生物科技有限公司（ Applied Cell?）专注于治疗用及生产用细胞培养产品研发与生产，目前公司产品已经涵盖干细胞、免疫细胞培养，冻存以及分离等领域。为保证产品标准化、一致性，我们对所有产品进行严格的原料筛选及生产控制。目前，我公司已通过ISO9001：2015质量管理体系认证。除提供产品支持，本公司的技术团队还可为您提供及时有效的技术支持、技术咨询，以及与您探讨感兴趣的科学问题和解决方案。最终我们希望通过高品质的产品及服务，不断推动细胞治疗、再生医学以及药物发展与创新，愿我们早日成为您在研发科研及应用领域的忠诚合作伙伴。
公司愿景:
我们努力成为中国细胞培养领域最顶尖产品与服务提供商。
公司使命: