| 产品编号 |
产品名称 |
产品包装 |
产品价格 |
| D2737-1μg |
pCMV-N-His |
1μg |
888.00元 |
pCMV-N-His是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达N端和His tag(His标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的5'端含有一个可以编码His标签的序列，因此可以表达出含有His标签的融合蛋白，可以方便地使用抗His的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-N-His质粒的主要信息如下：
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Feature Nucleotide
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Position
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CMV promoter
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1-602
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T3 promoter and T3 primer binding site
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620-639
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His tag
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679-696
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multiple cloning site
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699-772
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T7 promoter and T7 primer binding site
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815-836
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SV40 polyA signal
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847-1230
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f1 origin of ss-DNA replication
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1368-1674
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bla promoter
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1699-1823
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SV40 promoter
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1843-2181
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neomycin/kanamycin resistance ORF
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2216-3007
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HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
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3008-3466
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pUC origin
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3595-4262
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pCMV-N-His质粒的图谱如下：
pCMV-N-His的多克隆位点的详细图谱如下：
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His tag XmaI
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SacI M H H H H H H SmaI
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651
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GAGCTCCACC
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GCGGTGGCGG
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TCATCACCAT
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CTCGAGGTGG
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CGCCACCGCC
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AGTAGTGGTA
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PstI
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BamHI HindIII EcoRI EcoRV SalI BglII XhoI
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701
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CGGGCGGATC
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CAAGCTTCTG
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CAGGAATTCG
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ATATCGTCGA
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CAGATCTCTC
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GCCCGCCTAG
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GTTCGAAGAC
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GTCCTTAAGC
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TATAGCAGCT
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GTCTAGAGAG
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XbaI ApaI KpnI KpnI
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751
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GAGTCTAGAA
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CTAGTGGGCC
|
CGGTACCTTA
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ATTAATTAAG
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GTACCAGGTA
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CTCAGATCTT
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GATCACCCGG
|
GCCATGGAAT
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TAATTAATTC
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CATGGTCCAT
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pCMV-N-His中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-His)包括：
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Afl II
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Age I
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Ahd I
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Asc I
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Bbs I
|
Bbv II
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Blp I
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Bsg I
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BsiW I
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BsmB I
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BspM II
|
BsrG I
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BssH II
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Bst1107 I
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BstE II
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Ear I
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Eco47 III
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Eco72 I
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EcoN I
|
Esp I
|
Fse I
|
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Nru I
|
PflM I
|
Pme I
|
Pml I
|
PpuM I
|
Psp1406 I
|
Sap I
|
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Sca I
|
Spl I
|
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pCMV-N-His中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-His once)包括：
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Nde I
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CA`TA,TG
|
241
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Pvu I
|
CG,AT`CG
|
849
|
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SnaB I
|
TAC|GTA
|
347
|
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Bcl I
|
T`GATC,A
|
1003
|
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Nhe I
|
G`CTAG,C
|
598
|
|
Mun I
|
C`AATT,G
|
1096
|
|
Sac I
|
G,AGCT`C
|
656
|
|
Hpa I
|
GTT|AAC
|
1109
|
|
Sac II
|
CC,GC`GG
|
663
|
|
Mlu I
|
A`CGCG,T
|
1232
|
|
BstX I
|
CCAN,NNNN`NTGG
|
664
|
|
Dra III
|
CAC,NNN`GTG
|
1462
|
|
Not I
|
GC`GGCC,GC
|
669
|
|
Sfi I
|
GGCCN,NNN`NGGCC
|
2121
|
|
PspA I
|
C`CCGG,G
|
700
|
|
BseR I
|
GAGGAG 16/14
|
2164
|
|
Xma I
|
C`CCGG,G
|
700
|
|
Stu I
|
AGG|CCT
|
2167
|
|
Srf I
|
GCCC|GGGC
|
702
|
|
Cla I
|
AT`CG,AT
|
2186
|
|
Sma I
|
CCC|GGG
|
702
|
|
Kas I
|
G`GCGC,C
|
2345
|
|
BamH I
|
G`GATC,C
|
707
|
|
Nar I
|
GG`CG,CC
|
2346
|
|
Hind III
|
A`AGCT,T
|
713
|
|
Ehe I
|
GGC|GCC
|
2347
|
|
Pst I
|
C,TGCA`G
|
723
|
|
Bbe I
|
G,GCGC`C
|
2349
|
|
EcoR I
|
G`AATT,C
|
725
|
|
Msc I
|
TGG|CCA
|
2428
|
|
EcoR V
|
GAT|ATC
|
733
|
|
Tth111 I
|
GACN`N,NGTC
|
2464
|
|
Sal I
|
G`TCGA,C
|
737
|
|
BsrD I
|
GCAATG, 8
|
2579
|
|
Acc I
|
GT`MK,AC
|
738
|
|
Bsp1286 I
|
G,DGCH`C
|
2649
|
|
Bgl II
|
A`GATC,T
|
743
|
|
Rsr II
|
CG`GWC,CG
|
2862
|
|
PaeR7 I
|
C`TCGA,G
|
749
|
|
Rsr II
|
CG`GWC,CG
|
2862
|
|
Xho I
|
C`TCGA,G
|
749
|
|
BsiC I
|
TT`CG,AA
|
3028
|
|
Xba I
|
T`CTAG,A
|
755
|
|
BstB I
|
TT`CG,AA
|
3028
|
|
Spe I
|
A`CTAG,T
|
761
|
|
Bsa I
|
GGTCTC 7/11
|
3335
|
|
Bsp120 I
|
G`GGCC,C
|
767
|
|
HgiE II
|
ACCNNNNNNGGT-1/13
|
3675
|
|
Apa I
|
G,GGCC`C
|
771
|
|
ApaL I
|
G`TGCA,C
|
3950
|
pCMV-N-His质粒中对于插入片段进行测序时，推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下：
T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
T7 primer(815-836): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
pCMV-N-His的全序列信息：D2737 pCMV-N-His-seq.txt
包装清单：
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产品编号
|
产品名称
|
包装
|
|
D2737-1μg
|
pCMV-N-His
|
1μg
|
|
D2737-100μg
|
pCMV-N-His
|
100μg
|
|
—
|
说明书
|
1份
|
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。