名称 EDTA抗原修复液（50×）| EDTA Antigen Retrieval Solution（pH8.0）
规格 100ml | 500ml
*一个包装的本产品可以配制成5000毫升抗原修复液(1X)。按照每个片子需要10毫升抗原修复液(1X)计算，一个包装的本产品可以用于500个样品。
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产品简介
EDTA抗原修复液(EDTA Antigen Retrieval Solution)是一种常用的抗原修复液，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致蛋白之间的交联(cross-link)，从而遮蔽样品的抗原位点，导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果。
本抗原修复液采用了广泛使用的EDTA，可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果，但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时，可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看，无论冰冻切片还是细胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品，进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联，充分暴露抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。
本产品特别适合用于石蜡切片，也可以用于冰冻切片等其它样品。
本产品是 50×的浓缩液，使用之前按需要量用去离子水或双蒸水稀释至 1×。
使用说明
1. 对于石蜡切片：
a. 脱蜡：切片在二甲苯中脱蜡5分钟，再换用新鲜的二甲苯脱蜡，共用二甲苯脱蜡3次。无水乙醇5分钟，两次。90%乙醇5分钟，两次，70%乙醇5分钟，一次。蒸馏水5分钟，两次。
b.抗原修复：将切片浸泡在抗原修复液(1X)中，95-100℃加热约15分钟(加热时间可以控制在10-20分钟内，的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避
免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次，每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2. 对于冰冻切片：
用免疫染色洗涤液洗涤切片5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1X)中，95-100℃加热约15分钟(加热时间可以控制在10-20分钟内，的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次，每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
3. 对于其它样品的抗原修复，可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
注意事项
1）本抗原修复液使用前必须用重蒸水或MilliQ水稀释50倍，配制成抗原修复液(1X)。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
Formalin or other aldehyde fixation forms protein cross-links that mask the antigenic sites in tissue specimens, thereby giving weak or false negative staining for immunohistochemical detection of certain proteins. The EDTA based solution is designed to break the protein cross-links, therefore unmask the antigens and epitopes in formalin-fixed and paraffin embedded tissue sections, thus enhancing staining intensity of antibodies.
This buffer works excellent for many antibodies, but it often gives high background staining (maybe due to endogenous biotin revealed after this pretreatment). So primary antibody can often be highly diluted. It is very useful for low affinity antibodies or when tissue antigens are not intense.
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