Karnovsky固定液

Karnovsky固定液是组织化学中最常用的混合型固定液之一，主要成分含能快速渗透的多聚甲醛和缓慢渗透的戊二醛。它能很好保存组织的抗原性和精细结构，故尤其适用于电镜免疫化学样品的固定。本产品是在Karnovsky原始配方的基础上修改而得，它具有下列特点：

１．既可用于灌注法固定，也可用于浸泡法固定。

２．渗透能力强，固定均匀，组织收缩小，染色效果好。

３．适用范围广，可以用于固定从细菌、真菌，植物到动物的各种生物材料。

４．对原始配方进行了改良，不使用有毒的含砷化合物，减少了对操作者的毒害。

５．固定的组织经过包埋切片等处理用既可用于光学显微镜检测，也可用于电子显微镜检测。

操作步骤：

１．对动物，最后先灌注固定，然后再浸泡固定10-30分钟。对植物、真菌、细菌、病毒、原虫等材料，直接采用浸泡法固定。浸泡在Karnovsky固定液中的材料可以在4℃放置5年。

２．固定后的组织洗涤后即可用于包埋、切片、染色、检测等后续操作。

Karnovsky固定液固定时的注意事项：

(1)固定液量：20倍于材料的体积，以免固定液被稀释。

(2)选择合适的固定液：渗透力强的固定液既可以迅速进入组织中，又不使组织过度收缩或膨胀。

(3)固定的时间要合适：

与材料的大小和温度有关：材料大则时间长，材料小则时间短；温度高则时间短，温度低则时间长。

经固定的材料如不及时使用，可以经过90%酒精换到70%酒精中各半小时，再换入一次70%酒精，在0-4℃冰箱内可保存半年。经过较长时间保存的材料进行观察前可以换新的固定液再处理一次，效果较好。

Karnovsky固定液固定的条件：

(1)迅速渗入组织，杀死原生质。在杀死的短时期中，细胞形态不致有所变化。

(2)必须具有渗透力，对组织各部分的渗透力相等，可使组织内外完全固定。

(3)尽可能避免使组织膨胀或收缩。

(4)使细胞内的成分凝固或沉淀。

(5)增加细胞内含物的折光程度，易于鉴别。

(6)增加媒染作用和染色能力。

(7)使组织变硬，具有一定的硬度。

(8)固定以后能起到保存的作用。

(9)在凝固原生质以后，增加细胞对于各种穿透的抵抗力，不致于因以后的处理而使固定的原生质变形。

存储与运输：常温运输，2-8℃冷藏保存。

有效期12个月。

Karnovsky Fixative are ready-to-use electron microscopy (EM) fixative solutions that use a combination of paraformaldehyde and glutaraldehyde, referred to as formal-glutaraldehyde (F-G) fixative solutions.  This formal-glutaraldehyde mixture achieves rapid tissue penetration and optimal preservation and stabilization of cellular proteins.  Karnovsky fixatives are useful in research applications and are especially good for nervous system specimens and when tissues are larger than normal for electron microscopy standards.