名称 Nuclear/Cytosol Fractionation Kit
规格 50T | 100T
存储 提取液 2-8℃保存;蛋白酶抑制剂-20℃保存。有效期一年。
试剂组分
Component 50 assay 100 assay
Extract Reagent A(提取液 A) 20mL 40mL
Nuclear Store Buffer B(核保存液 B) 10mL 20mL
Protease Inhibitor Cocktail(蛋白酶抑制剂混合物) 100μL 200μL
REMARK:
1、蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。
2、如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
产品简介
细胞核/胞浆分离试剂盒可以从哺乳动物细胞中分离细胞核和胞浆组分。此试剂盒提供了一个系统,维持核和胞浆组分是分开和完整的。优化的试剂配方和程序可以快速分离胞核和胞浆,而几乎没有交叉污染。
本试剂盒提取的胞核和胞浆组分仍保持其生化功能,适合下游分析如转录活性,RNA拼接,gel-shift 分析,报告分析,酶活性分析和 WB 等。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
1)移液器、吸头
2)离心机及离心管
3)涡旋振荡器
4)冰箱,冰盒
注意事项
1. 本试剂盒仅供科学研究使用。
2. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
3. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
4. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
5. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
6. 使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
7. 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
使用说明
1. 取 5-10×106 个细胞(细胞数量根据实验情况调整,每次的提取液用量并不是一定的,大约为细胞体积的 5-10倍即可,请根据实际情况调整),在 4℃,500×g 条件下离心 2-3 分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
2. 用冷 PBS 洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。【注】在 4℃,500×g 条件下离心 5 分钟。
3. 在细胞沉淀中加入 400μl 冷的提取液 A,涡旋振荡混匀或吹打混匀,置冰上振荡 30 分钟。(没有振荡条件的话,也可冰上静置,中间每隔 5 分钟涡旋振荡或吹打混匀。)
4. 在 4℃,1200×g 条件下离心 5 分钟。
5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即得到胞浆组分,请置冰箱保存备用或直接用于下游实验。
6. 沉淀用 PBS 洗涤一次,然后在 4℃,2000×g 条件下离心 5 分钟,弃上清。
7. 沉淀为细胞核组分,将沉淀用 200μL 保存液 B 重悬后保存备用或直接用于下游实验。
关键字: 细胞核/胞浆分离试剂盒
康迪斯化工(湖北)有限公司是一家立足于生命科学领域有自主知识产权的高新技术企业,主要从事生物试剂的研发与生产,并以持续探索和开发生命科学技术为动力,致力于为科研工作者提供实用、高效的科研试剂,为生命科学的研究与发展提供有意义的帮助。