DAPI溶液

名称：DAPI溶液（即用型）

存储：-20℃，有效期至少2年

 产品简介

DAPI，也称DAPI dihydrochloride，是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。因为DAPI是含有特定AT序列DNA的一种嵌入剂，它能像Hoechst染料一样粘附在DNA双螺旋的小沟区。尽管DAPI不能通过活细胞膜，但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用来检测酵母线粒体DNA，叶绿体DNA，病毒DNA，microplasm DNA以及染色体DNA。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm和460nm。

DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。

Phygene的DAPI染液分为即用型（10ug/ml）与浓缩液（浓度为1mg/ml）。即用型工作液无需稀释，可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，可以满足各种常规染色的需要。浓缩液使用时根据实验不同直接将本产品用相应溶液稀释到工作浓度。

使用方法

1.固定的细胞或组织染色：对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色，则直接进行DAPI 染色。

a) 对于贴壁细胞或组织切片：加入适量DAPI染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。

b) 吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。

c) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm，发射波长460nm。

2.活细胞或组织染色：

a) 细胞培养物中加入适量DAPI染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。

b) 在 37℃培养细胞 10～20 分钟。

c) 用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm，发射波长460nm

注意事项

1）DAPI被普遍认为具有致癌性，操作时应戴手套，并避免交叉污染。

2）本产品需避光，并尽量避免反复冻融。

3）荧光染料都存在淬灭问题，建议染色后尽量当天完成检测。

4）为减缓荧光淬灭可以使用我们抗荧光衰减封片剂。