马斯亮蓝(Coomassie brilliant blue)是两种相似三苯甲烷染料的总称,有G250和R250两种,结构上前者比后者多了2个甲基,命名上 “G”为Green 的缩写,因G250的蓝色染料泛浅绿色;命名上“R”为Red的缩写,因R250的蓝色染料呈微红色调;“250”表示考马斯亮蓝的纯度。生化实验中常将考马斯亮蓝用于蛋白定量和蛋白电泳中蛋白染色。工作原理是:通过与蛋白质内的氨基和羧基基团间的静电结合作用以及范德华力,考马斯亮蓝与蛋白质形成强但非共价键连接的复合物。蛋白-染料复合物的形成稳定染料携带的负电荷阴离子(如磺酸基),从而产生在膜上或者胶上肉眼可见的蓝色。
考马斯亮蓝R250(Coomassie brilliant blue R250)更多用于电泳蛋白的染色,染色灵敏度比氨基黑高5倍,可达0.1µg蛋白。R250染色后需要褪色,才能进行蛋白条带的观察。
考马斯亮蓝G250的检测灵敏度虽然较低,但也可替代R250,使用一种快速而简单的方法进行蛋白染色。因其具有以下特性,即在低于pH 2.0时,溶液无色;pH 7.0时溶液呈深蓝黑色;若发生酸化,溶液呈现透明的棕褐色。当G250与蛋白结合,溶液又回到蓝色,主要因为蛋白分子周围具有更偏中性的pH环境。合适条件下,当把胶放在酸化的G250溶液中染色,显示出蓝色的蛋白条带,背景呈浅琥珀色。此种方法条带快速显色,且背景颜色也很浅使得条带看起来很清楚,则不需要做褪色处理。大部分蛋白用G250检测的下限是0.5µg。虽然灵敏度降低,取而代之的是操作快速以及方便,比R250染色节省高达11 h。
G250还可通过“Bradford method”用于蛋白质定量。
英文名称:Coomassie brilliant blue G250;Brilliant blue G;Serva blue G;Coomassie brilliant blue G;Brilliant indocyanin G;Brilliant blue G 250;Acid blue 90;C.I. 42655
其他名称:考马斯亮兰G250;酸性蓝90;考马斯亮蓝G;康美赛蓝G250;酸性艳蓝G;亮蓝
CAS号:6104-58-1
C47H48N3NaO7S2=854.02
级别:High purity grade
EM(595nm,H2O):>36300
生物染色试验:合格
性状:暗蓝-紫-棕色结晶粉末。溶于乙醇和热水呈亮蓝色,微溶于冷水。与浓硫酸显血红色,经稀释变为橙红色,水溶液加入氢氧化钠显紫色。水中溶解度:40 g/L (20℃)。吸收波长 610nm。有刺激性
用途:生化研究。用于胶电泳蛋白染色。不用渗透到胶里就比萘酚蓝黑B1(Naphthol Blue Black B1)灵敏度高3倍,简单而又灵敏;可以进行各种蛋白检测,和劳里反应相牵连的化学物质和游离氨基酸对此蛋白染色检测无任何影响。也是P2X7嘌呤能受体激动剂
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