细胞系
溶解方法
反应时间
应用
动物模型
剂量
注意事项
References:
Fluorescein -12-dUTP可用于直接酶标记DNA / cDNA,如PCR,随机引物DNA标记反应,引物延伸,Nick Translation等。它可以作为其天然对应物dTTP的替代物而被整合进入DNA/ cDNA。获得的染料标记的DNA / cDNA探针非常适合荧光杂交应用 - FISH或基于基因芯片的基因表达谱分析。与尿苷的C5位连接的优化接头确保了优化的底物特性和标记效率。推荐用于PCR和Nick Translation的Fluorescein-12-dUTP / dTTP比例:30-50%Fluorescein-12-dUTP / 70-50%dTTP。请注意:保护染料标记的dUTP免受光照,并在低光照条件下进行实验。染料标记的dUTP的终浓度可能取决于实际应用和实验条件。为了获得产品收率和高掺入率,建议对染料标记的dUTP / dTTP比率进行单独优化。
Fluorescein-12-dUTP可以作为以下酶的底物:
- Taq聚合酶
- phi29 DNA聚合酶
- DNA聚合酶I(全酶和Klenow片段)
- 末端转移酶
- 逆转录酶(例如AMV和M-MuLV)。
参考文献:[1]. Wiegant et al. (2001) Probe Labeling and Fluorescence in situ Hybridization. Current Protocols in Cytometry 8:8.3.1.[2]. Yie SM1, Xiao R, et, al. Progesterone regulates HLA-G gene expression through a novel progesterone response element. Hum Reprod. 2006 Oct;21(10):2538-44. Epub 2006 May 9.
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