cDNA第二链合成试剂盒
产品及特点cDNA 第二链合成的原理是用 RNase H 使 RNA-DNA 杂合链中的 RNA 产生切口，再用 DNA Polymerase I 通过切口平移(nick translation)反应进行RNA 链取代合成 cDNA 第二链，其示意图如下:
本产品具有下列特点：
1. 即开即用，含有合成 cDNA 第二链的所有试剂（包括 RNase H、E.coli DNA聚合酶 1 和 DNA ligase。
2. 一管式操作，不需要每次进行纯化，不丢失宝贵德样品。
3. 所得双链 cDNA 可以直接用于后续的常规 PCR、real-time PCR、cDNA 文库构建、抑制性差减杂交等。
4. 本试剂盒足够 30 次 80uL 体系的 cDNA 第二连合成反应。
规格及成分 成分 编号 十孔盒包装
5×cDNA 第二链合成缓冲液 131005a 250 μL
20×cDNA 第二链合成酶混合液 131005b 60 μL
0.5 M EDTA 溶液 130309 60 μL
超纯水 100935 1 mL
使用手册 131005sc 1 份
运输及保存 低温运输，-20℃保存，有效期一年。
自备试剂 cDNA 一链合成试剂等
使用方法 一、合成 cDNA 一条链
本试剂盒不提供 cDNA 一链合成试剂，用户需自备相关试剂合成 cDNA一链。
二、合成 cDNA 第二链
1. 在冰浴上向 5uL 已经完成 cDNA 一条链合成的反应体系（逆转录体系）中依次加入下表试剂，如果多于 5uL，请只取用 5uL：
成分 用量
超纯水 25 μL
cDNA 第二链合成缓冲液 8 μL
cDNA 第二链合成酶混合液 2 μL
共 40uL，轻柔吹打混匀后，短暂离心，16℃保温 2 小时
自备的 T4 DNA 聚合酶（见注） 1 μL
轻柔吹打混匀后，16℃继续保温 30 分钟
0.2M EDTA 溶液 2 μL
注：克隆双链 cDNA 一般需要平末端化，需要此步处理。PCR、SSH 等后续处
理一般不需要把双链 cDNA 平末端化，则可以跳过 T4 DNA 聚合酶处理步骤，
直接用 EDTA 终止反应。
2. 电泳 5 μL 检测 cDNA 质量。如果 cDNA 在 0.5-10Kb 的范围内呈模糊一片，则 cDNA 合格。如果没看见 cDNA 或有其他异常，需查找原因后再继续。
3. 所得 cDNA 可以直接用于后续的常规 PCR、real-time PCR、cDNA 文库构建、抑制性差减杂交（SSH）等实验。
关键字： cDNA第二链合成试剂盒厂家；cDNA第二链合成试剂盒价格；cDNA第二链合成试剂盒说明书
上海泽叶生物科技有限公司是一家服务于生命科学领域的高新技术企业，主要为科研机构、高校、院所及企业产品开发研究提供所需要的科研类试剂、耗材、仪器、技术服务等。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学、材料科学，通用试剂、药物合成试剂、手性化合物、催化剂及配体、分析试剂、生物试剂，检测试剂等等