Dinaciclib (CDK抑制剂)

化学名

2-[(2S)-1-[3-ethyl-7-[(1-oxidopyridin-1-ium-3-yl)methylamino]pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-5-yl]piperidin-2-yl]ethanol

简称

Dinaciclib

别名

MK-7965, SCH727965, SCH 727965, SCH-727965

中文名

N/A

化学式

C₂₁H₂₈N₆O₂

分子量

396.49

CAS号

779353-01-4

纯度

98%

溶剂/溶解度

Water<1mg/ml; DMSO26mg/ml warming; Ethanol8mg/ml warming

溶液配制

5mg加入1.26ml DMSO，或者每3.96mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC6628-10mM用DMSO配制。

产品描述

Dinaciclib (SCH727965)是一种新型有效的CDK抑制剂，作用于CDK2、CDK5、CDK1和CDK9，无细胞试验中IC50分别为1nM、1nM、3nM和4nM。它也会阻断胸甘(dThd) DNA整合。Phase 3。

信号通路

Cell Cycle

靶点

CDK2

CDK5

CDK1

CDK9

－

IC50

1nM

1nM

3nM

4nM

－

体外研究

Dinaciclib抑制CDK1和CDK9效果差不多，但是抑制CDK2和CDK5效果则分别强12和14倍。Dinaciclib作用于A2780细胞，有效抑制的DNA复制，抑制胸甘(dThd)DNA摄入，IC50为4nM。Dinaciclib浓度大于6.25nM时，强抑制Rb在Ser 807/811位点磷酸化。Rb磷酸化的完全抑制与凋亡发生相关，通过用浓度大于6.25nM的Dinaciclib处理的细胞中p85 PARP裂解产物的出现来表示。Dinaciclib有效作用于广谱人肿瘤细胞系。在羟基脲处理期间加入Dinaciclib，也抑制γ-H2AX累积，这种作用存在剂量依赖性。Dinaciclib抑制恶性黑色素瘤细胞增殖，使恶性黑色素瘤细胞发生大规模凋亡。Dinaciclib诱导一些骨肉瘤细胞系凋亡，包括抗Doxorubicin和Dasatinib的细胞。Dinaciclib降低RNAP II在 serine 2位点磷酸化，也降低CDK抑制剂p27Kip1在threonine 187位点磷酸化。加入12nM到40nM Dinaciclib处理4小时或16小时，最易使磷酸化作用降低。Dinaciclib也降低Rb在serine 807/811位点磷酸化。Dinaciclib诱导mock-和p53-耗尽的U2OS细胞凋亡，凋亡程度相似。

体内研究

Dinaciclib每天按8、16、32和48mg/kg剂量腹腔注射处理，持续10天，导致肿瘤受抑制分别为70%、70%、89%和96%。Dinaciclib MED(最低有效剂量)约为小于8mg/kg。Dinaciclib耐药性良好，且最高剂量处理组中体重损失最高为5%。Dinaciclib在体内具有抗癌活性，存在剂量依赖性，按低于MTD(最高耐受剂量)的剂量水平处理，几乎完全抑制肿瘤生长。Dinaciclib作用于小鼠，具有短暂的血浆半衰期。

临床实验

N/A

特征

N/A

酶活性检测实验

方法

设计从Sf9细胞中纯化的重组cyclin/CDK 全酶，产生表达特定cyclin 或CDK的杆状病毒。在含 50mM Tris-HCl(pH 8.0)、10mM MgCl₂、1mM DTT和0.1mM原钒酸钠的反应buffer中，Cyclin/CDK复合体稀释成终浓度为50μg/ml。每种激酶反应中，1μg酶和20μl 2μM 底物溶液(组蛋白H1衍生的一种生物素化的肽段)混合，然后与10μl稀释的Dinaciclib结合。加入50μl 2μM ATP和0.1μCi 33P-ATP反应开始。激酶反应在室温下进行1小时，然后加入0.1% Triton X-100，1mM ATP，5mM EDTA和5mg/ml链霉亲和素包被的SPA磁珠而终止反应。使用96-孔GF/B过滤板和Filtermate广谱收集器收集SPA磁珠。用2M NaCl冲洗磁珠两遍，然后用含磷酸的2M NaCl再冲洗两遍。使用TopCount 96孔液体闪烁计数器测定信号。

细胞实验

细胞系

A2780细胞

浓度

0μM-5μM

处理时间

24小时

方法

A2780细胞培养在含10%FBS的DMEM培养基上，每周移动两次，通过使用胰蛋白酶-EDTA分离单细胞层。在96孔Cytostar-T板上每孔加入100μl A2780细胞(5×10³个)，然后在37℃下温育16到24小时。Dinaciclib在含2% 14C标记dThd的完全培养基上连续稀释。培养基从Cytostar T板上转移，按一式四份加入200μl多种Dinaciclib稀释液，然后细胞在37℃下温育24小时。使用闪烁亲近法测定，在TopCoun上测量累积的放射性标记物渗透率。

动物实验

动物模型

携带A2780肿瘤的裸鼠

配制

20%羟丙基-β-环糊精

剂量

8mg/kg，16mg/kg，32mg/kg和48mg/kg

给药方式

腹腔注射

产品编号

产品名称

包装

KL6628-10mM

Dinaciclib (CDK抑制剂)

10mM×0.2ml

KL6628-5mg

Dinaciclib (CDK抑制剂)

5mg

KL6628-25mg

Dinaciclib (CDK抑制剂)

25mg

—

说明书

1份