J82 Cell:人膀胱移行癌细胞系

"J82 Cell:人膀胱移行癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：电子显微镜下未观察到桥粒但观察到数目不同的粗面内质网和突出微丝。 含ras (H-ras)癌基因。
SKRC-20细胞系相关产品：NCI-H2342细胞、JOSK-M细胞、SUM 52细胞
Balb/c3T3细胞系相关产品：IPLB-SF 21AE细胞、DLM8细胞、BL6细胞
Kuramochi细胞系相关产品：OCI-AML-4细胞、OP9细胞、SNU-C1细胞
CNE-2Z细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-27细胞、WM35细胞、Line 870 Emory University-4细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
J82 Cell:人膀胱移行癌细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提高血清浓度(最高不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MGH-U3 (RN)细胞系相关产品：P3X63Ag8细胞、MCF-10 Attached细胞、BV-173细胞
MDCC-MSB-1细胞系相关产品：C-33-A细胞、RDES-1细胞、NCI-H1623细胞
Tca-83细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-33细胞、NCI-H1648细胞、NCI-H1355细胞
NOR10细胞系相关产品：NCI-SNU-387细胞、SL-29细胞、UM-UC14细胞
EC109细胞系相关产品：Ra No. 1细胞、Institute for Medical Research-90细胞、COLO678细胞
细胞生长特性：贴壁生长
J82 Cell:人膀胱移行癌细胞系
贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！
细胞形态特性：上皮细胞样
LAN-1细胞系相关产品：NCIH460细胞、KMM1细胞、BTI-Tn5B14细胞
L- cell细胞系相关产品：UMR 106细胞、32D CL3细胞、SK MEL-28细胞
H-865细胞系相关产品：Huh-7.5细胞、A20细胞、SKES-1细胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞系相关产品：SHSY5Y细胞、QBI-293A细胞、NCIH1623细胞
LS 180细胞系相关产品：HT-1080细胞、MODE-K细胞、H-661细胞
MRC-9细胞系相关产品：NCIH1155细胞、Hep-3B细胞、SNU-C2A细胞
Bac 1.2F5细胞系相关产品：130-T细胞、K422细胞、NTERA-2cl.D1细胞
J82 Cell:人膀胱移行癌细胞系
MTC-TT细胞系相关产品：UMC11细胞、MeWo细胞、HBVSMC细胞
CHO-K1细胞系相关产品：V 79细胞、MCF 7细胞、NCI-HUT-69细胞
P3 (Jiyoye)细胞系相关产品：hMSC-BM细胞、CCD-1095Sk细胞、B-95-8细胞
Panc 04.03细胞系相关产品：Mono-Mac-1细胞、T2(174 x CEM.T2)细胞、L428细胞
EOC20细胞系相关产品：COV-434细胞、AgC11x3A细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞
MDA MB 436细胞系相关产品：U266-B1细胞、EAC-E2G8细胞、KM12-SM细胞
CCRF-CEM C7细胞系相关产品：1301细胞、Colon 26细胞、Alexander细胞
alpha TC1.6细胞系相关产品：HO1N1细胞、MIN-6细胞、BC-024细胞
AML-EOL-1细胞系相关产品：HSAS1细胞、FAK+/+细胞、NCI-H2009细胞
HCC827细胞系相关产品：CAL 148细胞、CHO-S细胞、NTERA-2/D1细胞
BC-009细胞系相关产品：MCF-7细胞、L-540细胞、Pt-K1细胞
LM1细胞系相关产品：MDA231-LM2-4175细胞、TCC Sup细胞、149PT细胞
Lewis lung carcinoma line 1细胞系相关产品：MDA157细胞、IPEC-1细胞、SNU119细胞
MB157细胞系相关产品：SNU-1细胞、18G3.cl 1细胞、SK-ChA-1细胞
Hepa-RG细胞系相关产品：SF 763细胞、DHL4细胞、NCIH1373细胞
NCIH1975细胞系相关产品：SW 480细胞、Tb 1 Lu细胞、ME-1 [Human leukemia]细胞
3T3J2细胞系相关产品：UMRC2细胞、CAL-39细胞、HEK-293-FT细胞
BTI-Tn5B14细胞系相关产品：Hs 281.T细胞、CNE2细胞、LNCaP-ATCC细胞
OSA细胞系相关产品：SHIN3细胞、SUDHL-4细胞、OCI-Ly07细胞
R2C细胞系相关产品：Y3-Ag1,2,3细胞、SW-620细胞、HOP-92细胞
KG1A细胞系相关产品：Colon-26细胞、UWB1.289+BRCA1细胞、Anip973细胞
HS578T细胞系相关产品：MDA-468细胞、EAhy 926细胞、LA-N-6(OAN)细胞
Colon 26细胞系相关产品：Jiyoye (P-2003)细胞、Ramos细胞、MHCC97细胞
A 172细胞系相关产品：A427细胞、BEAS2B细胞、Tissue Culture-1细胞
HLFa细胞系相关产品：H1563细胞、SNU-398细胞、H2196细胞
GM07404D细胞系相关产品：H1838细胞、NS20Y细胞、KP2细胞
H-2085细胞系相关产品：BC-PAP细胞、GTL16细胞、NCTC 3960细胞
RS(4;11)细胞系相关产品：Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞、MUTZ1细胞、THLE2细胞
NCIH740细胞系相关产品：95C细胞、NCI-H3255细胞、CCC-HHM-2细胞
C3H10T1/2 clone8细胞系相关产品：COS-1细胞、MCF10A细胞、NCIH322细胞
SCC 9细胞系相关产品：MLE-12细胞、SK-MEL-24细胞、GM03671C细胞
Medical University of Graz-Chordoma 1细胞系相关产品：HEH2细胞、CA46细胞、B95-8细胞
SW-837细胞系相关产品：P3HR-1细胞、WM451Lu细胞、TCam-2细胞
D324细胞系相关产品：IMR32细胞、NCI-H211细胞、RMC-1细胞
AU-565细胞系相关产品：LCLC-103H细胞、Clone 166细胞、Panc04.03细胞
Hs895T细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 7951细胞、SK-N-AS细胞、MOLP2细胞
MLFC细胞系相关产品：Murine Carcinoma-38细胞、Karpas422细胞、MM1细胞
IAR20细胞系相关产品：SW 1222细胞、WIL2-S细胞、NCIH1573细胞
MM-1S细胞系相关产品：C12细胞、Human Embryonic Skin细胞、G 292 Clone A 141B1细胞
TW 01细胞系相关产品：A20细胞、ECC-1细胞、SC细胞
MGH-U1 (EJ)细胞系相关产品：Lewis lung carcinoma line 1细胞、HBL-100细胞、H1436细胞
SUIT 2细胞系相关产品：K562/ADR细胞、P-3J细胞、SUDHL5细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞系相关产品：MDCKII细胞、NCI-HUT-596细胞、SK-ES细胞
J82 Cell:人膀胱移行癌细胞系
MTEC1细胞系相关产品：HCC-1833细胞、Vero 76 clone E6细胞、HS-294细胞
Tj-905细胞系相关产品：GH 3细胞、COLO678细胞、mousepodocyte细胞
NCI H508细胞系相关产品：NB9细胞、NK-92.05细胞、J45.01细胞
GM03569D细胞系相关产品：MSTO-211H细胞、MDA MB 175 VII细胞、HL-60 clone15细胞
SK-N-DZ细胞系相关产品：A-1847细胞、EC109细胞、BEL 7405细胞
rHSC-99细胞系相关产品：624细胞、Onda 11细胞、Panc327细胞
SBC3细胞系相关产品：L-M[TK-]细胞、RPE1细胞、WERI Rb-1细胞
MPC5细胞系相关产品：COLO-HSR细胞、CCRF.CEM细胞、H-2052细胞
HIEC细胞系相关产品：Hs 600.T细胞、DoHH-2细胞、CCRF.CEM细胞
HLFa细胞系相关产品：H1563细胞、SNU-398细胞、H2196细胞
Human ErythroLeukemia细胞系相关产品：EBC-1细胞、LAN6细胞、GM3570细胞
NB19细胞系相关产品：IHC-ST1细胞、OSC19细胞、CHL1细胞
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