WM266-4 Cell:人黑素瘤细胞系

"WM266-4 Cell:人黑素瘤细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
SNU1细胞系相关产品：K-1735细胞、SNU449细胞、MM-1S细胞
DMS-79细胞系相关产品：U031细胞、AM38细胞、UMUC1细胞
AR4-2J细胞系相关产品：Epithelioma Papulosum Cyprini细胞、HNEpC细胞、HS0578T细胞
NCI-H226细胞系相关产品：Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞、H820细胞、RA细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
WM266-4 Cell:人黑素瘤细胞系
细胞的冻存：目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０(６)～１×１０(７)/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HT-1376细胞系相关产品：SUSM1细胞、NCI-H716细胞、KBM7细胞
BHT101细胞系相关产品：NBL-7细胞、MB231细胞、UMUC-3细胞
NT2/D1细胞系相关产品：H-2170细胞、KYSE0410细胞、Y79细胞
NCIH1975细胞系相关产品：SW 480细胞、Tb 1 Lu细胞、ME-1 [Human leukemia]细胞
Vero 76细胞系相关产品：SK-N-BE(1)细胞、HM细胞、PG-4 S+L-细胞
细胞生长特性：贴壁生长
WM266-4 Cell:人黑素瘤细胞系
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性：详见细胞说明书
Fox/NY细胞系相关产品：ZR751细胞、HCS-2/8细胞、SNB-19细胞
WEHI 3B细胞系相关产品：Tca-8113细胞、4T1.2细胞、Nb2-11细胞
A9 (Hamprecht)细胞系相关产品：HLF细胞、CFSC-2G细胞、HEK293S细胞
NCI-H1792细胞系相关产品：MA 104细胞、COLO 678细胞、A-375SM细胞
KATOIII细胞系相关产品：NCI-841细胞、Z310细胞、NIH:OVCAR-4细胞
Karpas-422细胞系相关产品：Colon 38细胞、T.T细胞、Caco-2/ATCC细胞
LC-1Sq细胞系相关产品：NCIH2172细胞、Hs 281.T细胞、Ramos G6.C10细胞
WM266-4 Cell:人黑素瘤细胞系
NCIH524细胞系相关产品：SDBMSC细胞、MDA-415细胞、Kit225细胞
NUGC-3细胞系相关产品：H-735细胞、MOLT 16细胞、HTR-8/SV neo细胞
Oregon J-111细胞系相关产品：RGC6细胞、hTERT-HME1细胞、ARIP细胞
MHCC-LM3细胞系相关产品：C-28I2细胞、JROECL19细胞、Hs934T细胞
OCILY3细胞系相关产品：Madison细胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞、HEK AD293细胞
OCI/AML2细胞系相关产品：BrCL18细胞、CORL26细胞、MDA415细胞
MDA134细胞系相关产品：RBL 1细胞、H-1993细胞、MDCK细胞
CCLP-1细胞系相关产品：NPC-TW-039细胞、CORL51细胞、A20细胞
HeLa-229细胞系相关产品：HEK 293T/17细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞、SP2/0 Ag-14细胞
HeLa-229细胞系相关产品：HEK 293T/17细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞、SP2/0 Ag-14细胞
H-EMC-SS细胞系相关产品：BSC-40细胞、HS 683T细胞、U-373 MG细胞
NCI-H87细胞系相关产品：7404细胞、RH-35细胞、COLO824细胞
NP69细胞系相关产品：H-2023细胞、LM(TK-)细胞、NCI-H1573细胞
Dysplastic Oral Keratinocyte细胞系相关产品：ACC2细胞、SK-RC-42细胞、SKMEL1细胞
MDBK (NBL-1)细胞系相关产品：H378细胞、RIN-m细胞、COR-L23/P细胞
OS-RC-2细胞系相关产品：NUGC2细胞、SF-767细胞、3T6细胞
HFL细胞系相关产品：HeLaS3细胞、hTERT RPE-1细胞、SKLU-1细胞
Hs_578t细胞系相关产品：NOZC-1细胞、MILE SVEN 1细胞、NCIH1876细胞
Transformed Human Liver Epithelial-3细胞系相关产品：NRCC细胞、TE-1细胞、S.B.细胞
HEYA8细胞系相关产品：Hs675T细胞、SJRH30细胞、FET细胞
AtT 20细胞系相关产品：HN13细胞、A549/ATCC细胞、MCF7/WT细胞
Hs675T细胞系相关产品：A2780/CP70细胞、Tu-177细胞、624 MEL细胞
HONE1细胞系相关产品：T2 (174 x CEM.T2)细胞、TR-146细胞、Rin-M-5F细胞
HTR8细胞系相关产品：JHH2细胞、Farage OL细胞、HDQP1细胞
NCI-H2342细胞系相关产品：174xCEM.T2细胞、NCIH889细胞、hEEC细胞
KG1细胞系相关产品：BE2M17细胞、U-87MG ATCC细胞、Hs 766T细胞
ONS76细胞系相关产品：TCam 2细胞、He-La细胞、MG63细胞
SUM 159PT细胞系相关产品：GM02132细胞、TE-5细胞、P3-X63Ag8.653细胞
EAC细胞系相关产品：U-373 MG细胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞、Swiss-3T3细胞
NRK52E细胞系相关产品：HCC-1500细胞、SK-MEL-2细胞、SKNEP1细胞
HAVSMC细胞系相关产品：HCC95细胞、P3/NS1/1-Ag4-1细胞、Colon-38细胞
H-1417细胞系相关产品：CFPAC1细胞、NCIH1581细胞、KOSC-2 cl3-43细胞
LL/2细胞系相关产品：MDA-436细胞、TCCPAN2细胞、BEP2D细胞
Wien-133细胞系相关产品：NCI-322细胞、NL20细胞、NCIH2030细胞
H1882细胞系相关产品：HONE1细胞、L cell细胞、LY细胞
AML-12细胞系相关产品：HEL 299细胞、H1672细胞、CEF细胞
Hs 940.T细胞系相关产品：CoC1细胞、TE10细胞、MEF (CF-1)细胞
BC3H1细胞系相关产品：T9细胞、OC 316细胞、NS-20Y细胞
Eca109细胞系相关产品：H283细胞、B104 [Rat neuroblastoma]细胞、H1341细胞
hOMF细胞系相关产品：Nthy ori 3.1细胞、JM-1细胞、OV 2008细胞
P3X63 Ag8细胞系相关产品：H-2291细胞、FCCH1024细胞、SU-DHL6细胞
SNU-119细胞系相关产品：HL7702细胞、IBRS2细胞、PaCa2细胞
C166细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、NCI-SNU-601细胞、NCI-H847细胞
WM266-4 Cell:人黑素瘤细胞系
NOR10细胞系相关产品：NCI-SNU-387细胞、SL-29细胞、UM-UC14细胞
OCM1A细胞系相关产品：686LN-M4e细胞、C-Lu-65细胞、HUT 226细胞
UMUC1细胞系相关产品：HLE细胞、HFL-1细胞、H-2029细胞
OVCAR-5细胞系相关产品：R 1610细胞、Lieming Xu-2细胞、VSC4.1细胞
MASMC细胞系相关产品：MDA-MB-468-RED细胞、K562/ADR细胞、RPMI8226细胞
2PK3细胞系相关产品：NIH 3T6细胞、Lewis-Lung细胞、NTERA2D1细胞
TR-146细胞系相关产品：MDA-231细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞、CHO细胞
OSK-1细胞系相关产品：REC-1细胞、Pro-5 Lec1.3c细胞、A-549细胞
Rin-M-5F细胞系相关产品：HuP-T3细胞、HCC-1806细胞、EOC-20细胞
SU8686细胞系相关产品：BRL3A细胞、PANC-28细胞、LuCL4细胞
143B细胞系相关产品：JVM2细胞、Hs-695-T细胞、V 79-4细胞
MDCK (NBL-2)细胞系相关产品：KMS-26细胞、EL 4细胞、SW 1222细胞
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